NEFELOMETRIJA: NO KĀ TĀ SASTĀV, UN LIETOJUMPROGRAMMAS - ĶĪMIJA - 2025

Nefelometrisko ietver mērījumus starojumu, ko rada daļiņas (šķīdumā vai suspensijā) un jaudas mērīšanai izkaisīti starojuma leņķī virzienā starojums.

Kad suspendēto daļiņu skar gaismas stars, ir daļa gaismas, kas atstarojas, cita daļa tiek absorbēta, cita tiek novirzīta, bet pārējā daļa tiek pārraidīta. Tāpēc, kad gaisma nonāk caurspīdīgā vidē, kurā ir cietu daļiņu suspensija, suspensija šķiet duļķaina.

Kas ir nephelometrija?

Starojuma izkliede ar daļiņām šķīdumā

Brīdī, kad gaismas stars triecas suspendētās vielas daļiņās, staru izplatīšanās virziens maina tā virzienu. Šis efekts ir atkarīgs no:

1.Daļiņu izmēri (izmērs un forma).

2. Suspensijas raksturojums (koncentrācija).

3.Gaismas viļņa garums un intensitāte.

4.Iekļaujošās gaismas attālums.

5. Noteikšanas leņķis.

6. Barotnes refrakcijas indekss.

Nefelometrs

Nefelometrs ir instruments, ko izmanto suspendēto daļiņu mērīšanai šķidrā paraugā vai gāzē. Tādējādi fotoelements, kas novietots 90 ° leņķī pret gaismas avotu, nosaka starojumu no suspensijā esošajām daļiņām.

Tāpat gaisma, ko daļiņas atspoguļo fotoelementa virzienā, ir atkarīga no daļiņu blīvuma. 1. diagrammā parādīti galvenie komponenti, kas veido nephelometru:

1. attēls. Nefelometra pamatkomponenti.

LĪDZ.

Nefelometrijā ir ārkārtīgi svarīgi, lai būtu starojuma avots ar lielu gaismas jaudu. Ir dažādi veidi, sākot no ksenona lampām un dzīvsudraba tvaika lampām, volframa halogēna lampām, lāzera starojuma, cita starpā.

B.

Šī sistēma atrodas starp starojuma avotu un kiveti, tāpēc šādā veidā uz kivetes tiek novērsts starojums ar dažādiem viļņu garumiem, salīdzinot ar vēlamo.

Pretējā gadījumā fluorescences reakcijas vai sildīšanas efekti šķīdumā izraisītu mērījumu novirzes.

C.

Tas parasti ir prizmatisks vai cilindrisks trauks, un tam var būt dažādi izmēri. Tas ir pētāmais risinājums.

D.

Detektors atrodas noteiktā attālumā (parasti ļoti tuvu kivetei) un ir atbildīgs par suspensijas daļiņu izkaisītās radiācijas noteikšanu.

UN.

Parasti tā ir elektroniska mašīna, kas saņem, pārveido un apstrādā datus, kas šajā gadījumā ir mērījumi, kas iegūti veiktā pētījumā.

Atkāpes

Uz katru mērījumu attiecas kļūdas procents, ko galvenokārt aprēķina:

Piesārņotās šūnas: šūnās jebkurš aģents, kas atrodas ārpus pētāmā šķīduma, neatkarīgi no tā, vai tas atrodas šūnā vai ārpus tās, samazina starojošo gaismu ceļā uz detektoru (šūnas ir bojātas, putekļi pielīp pie šūnas sienām).

Traucējumi : mikrobu piesārņojuma klātbūtne vai duļķainība izkliedē starojuma enerģiju, palielinot izkliedes intensitāti.

Fluorescējoši savienojumi : tie ir savienojumi, kas, uzbudināti ar nejaušu starojumu, rada kļūdainus un augsta izkliedes blīvuma rādījumus.

Reaģentu uzglabāšana : Nepietiekama sistēmas temperatūra var izraisīt nelabvēlīgus pētījuma apstākļus un izraisīt duļķainus vai nogulsnētus reaģentus.

Elektroenerģijas svārstības : lai negadījumu starojums nebūtu kļūdu avots, vienmērīgam starojumam ieteicams izmantot sprieguma stabilizatorus.

Metroloģiskie raksturlielumi

Tā kā atklātā starojuma starojuma jauda ir tieši proporcionāla daļiņu masas koncentrācijai, nephelometriskajiem pētījumiem teorētiski ir augstāka metroloģiskā jutība nekā citām līdzīgām metodēm (piemēram, turbidimetrija).

Turklāt šai metodei nepieciešami atšķaidīti risinājumi. Tas ļauj samazināt gan absorbcijas, gan refleksijas parādības.

Lietojumprogrammas

Nefelometriskie pētījumi ieņem ļoti svarīgu vietu klīniskajās laboratorijās. Pielietojums svārstās no imūnglobulīnu un akūtas fāzes olbaltumvielu noteikšanas, komplementa un koagulācijas.

Imūnkompleksu noteikšana

Kad bioloģiskais paraugs satur interesējošo antigēnu, tas tiek sajaukts (buferšķīdumā) ar antivielu, veidojot imūno kompleksu.

Nefelometrija mēra gaismas daudzumu, ko izkliedē antigēna-antivielu reakcija (Ag-Ac), un šādā veidā tiek atklāti imūno kompleksi.

Šo pētījumu var veikt ar divām metodēm:

Beigu punkta nephelometrija:

Šo paņēmienu var izmantot galapunkta analīzē, kurā pētītā bioloģiskā parauga antivielas inkubē divdesmit četras stundas.

Ag-Ac kompleksu mēra, izmantojot nefelometru, un izkliedētās gaismas daudzumu salīdzina ar to pašu mērījumu, kas veikts pirms kompleksa veidošanās.

Kinētiskā nephelometrija

Šajā metodē nepārtraukti tiek uzraudzīts kompleksa veidošanās ātrums. Reakcijas ātrums ir atkarīgs no antigēna koncentrācijas paraugā. Šeit mērījumus veic kā laika funkciju, tāpēc pirmais mērījums tiek veikts laikā "nulle" (t = 0).

Kinētiskā nephelometrija ir visplašāk izmantotā metode, jo pētījumu var veikt 1 stundā, salīdzinot ar beigu punkta metodes ilgu laika periodu. Dispersijas koeficientu mēra tūlīt pēc reaģenta pievienošanas.

Tāpēc, kamēr reaģents ir nemainīgs, esošā antigēna daudzumu uzskata par tieši proporcionālu izmaiņu ātrumam.

Citas lietotnes

Nefelometriju parasti izmanto ūdens ķīmiskās kvalitātes analīzē, lai noteiktu skaidrību un kontrolētu tās apstrādes procesus.

To izmanto arī gaisa piesārņojuma mērīšanai, kurā daļiņu koncentrāciju nosaka pēc dispersijas, ko tās rada krītošā gaismā.

Atsauces

1. Britannica, E. (nd). Nefelometrija un turbidimetrija. Atgūts no britannica.com
2. Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetrija un nefelometrija. Izgūts no pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (nd). Atgūts no technochemical.com
4. Morīze, IV (2006). Turbidimetriskā un nephelometriskā plūsmas analīze. Iegūts no repository.ucp.p
5. Sasons, S. (2014). Nefelometrijas un turbidimetrijas principi. Atgūts no notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stenlijs, J. (2002). Imunoloģijas un seroloģijas pamati. Albany, NY: Thompson mācīšanās. Iegūts no books.google.co.ve
7. Wikipedia. (sf). Nefelometrija (zāles). Atgūts no vietnes en.wikipedia.org