AKSOLOTLS: RAKSTUROJUMS, BIOTOPS, DZĪVES CIKLS, REPRODUKCIJA - BIOLOĢIJA - 2025

Aksolotls (Ambystoma mexicanum) ir endēmiska amfībija kanāli ezera Xochimilco, kas atrodas pilsētas centrā Mehiko. Lai arī tā pieder pie Ambystomatidae dzimtas, metamorfoze šai sugai dabiski nenotiek, tāpēc visu mūžu tā saglabājas kāpuru stāvoklī.

Pašlaik aksolotlam ir kritisks izzušanas drauds, jo ir ievērojami samazinājies iedzīvotāju skaits dabiskajā dzīvotnē. Tas ir vientuļš dzīvnieks, kurš sazinās ar vizuāliem vai ķīmiskiem signāliem gandrīz tikai pārošanās sezonā.

Avots: Vassil, no Wikimedia Commons

Tomēr tā nav zivs, bet gan Neotenian salamandra. Tā neotēniskais raksturs attiecas uz faktu, ka tai ir spēja vairoties, kaut arī kā pieaugušais tas saglabā savas kāpuru stadijas ūdens īpašības.

Ļoti retos gadījumos aksolotls var veikt metamorfozi līdz zemes fāzei. Mākslīgi to var izraisīt laboratorijā, ievadot hormonālas ķimikālijas.

Protams, metamorfoze notiktu tikai hibrīda dēļ vai ja nelabvēlīgi būtu apkārtējās vides apstākļi. Tomēr šie gadījumi ir ļoti sporādiski.

Mitoloģisks dzīvnieks

Aksolotls ir dzīvnieks, kas atzīts par Meksikas ikonu. Acteku mitoloģijā šis dzīvnieks ir dieva Kólotla ūdens piesaukšana.

Saskaņā ar acteku kultūru, lai kustētu Piekto Sauli, bija jāziedo visi dievi. Ksilotls paslēpa sevi, pārvērties par kukurūzas augu, kad ieraudzīja, ka atklāj, ka paslēpies, iegūstot gliemenes formu.

Atkal viņu atrada izpildītājs, un viņam nācās bēgt uz ūdeni, kur viņš pārtapa par dzīvnieku, ko sauc par aksolotlu. Viņu beidzot noķēra un nomira. Šī iemesla dēļ aksolotls bija viens no acteku karalistes iecienītākajiem gardumiem.

Izmeklēšana

Mūsdienu zinātniskajā pasaulē aksolotlu izmanto kā paraugorganismu dažādos pētījumos. Viens iemesls ir tas, ka šo sugu ir salīdzinoši viegli pavairot nebrīvē.

Turklāt, tā kā embrijs ir liels un olšūna ir gandrīz caurspīdīga, tas ļauj vizualizēt attīstību dažādos tās posmos. Spēja reģenerēties ir būtisks faktors, lai eksperimentētu šajā studiju jomā.

Pašlaik tiek veikti pētījumi par sirds defektiem. Tas notiek tāpēc, ka aksolotlā ir mutants gēns, kas embrijos izraisa sirds mazspēju.

Tas ir arī modelis neirālās caurules slēgšanas pētījumos, jo ir liela līdzība starp aksolotla un cilvēka neironu plāksni.

Reģenerācija

Cilvēkiem un citiem mugurkaulnieku zīdītājiem ir ļoti ierobežotas dabiskās spējas atjaunot dažas zaudētās ķermeņa daļas.

Turpretī Ambystoma mexicanum nedziedē brūces ar rētu veidošanos, tas tiek darīts, atjaunojot zaudētos piedēkļus vai dažas dzīvībai svarīgas struktūras, ieskaitot īpašus smadzeņu apgabalus. Ir gadījumi, kad axolotl papildus ievainoto ekstremitāšu labošanai var atjaunot arī papildu.

Ņemot vērā, ka vairākām aksolotla struktūrām un sistēmām ir tāda pati anatomija kā cilvēkiem, pārvaldot informāciju par to, kā notiek šī dzīvnieka reģenerācijas process, iegūtu svarīgus datus medicīnā.

Tomēr šos pētījumus ierobežo grūtības strādāt ar šo sugu molekulārā līmenī. Genomi ir lieli, kas neļāva to pilnībā secēt.

Pašlaik šīs grūtības tiek risinātas, strādājot ar mRNS ietverto informāciju. Šie dati ļauj atklāt mehānismus, kas notiek molekulārā līmenī reģeneratīvajos bioloģiskajos procesos.

Vispārīgais raksturojums

Aste

Šim paraugam ir aste, kurai raksturīga tā, ka tā ir saplacināta uz sāniem. Tas ir liels garums, tā garums ir vienāds ar pusi no ķermeņa.

Mugurkauls

Aksolotļiem ir skelets, kas nav pilnībā pārkaulojies. To var redzēt filiāles apgabalā, kuru galvenokārt veido skrimšļi.

Mugurkauls ir ļoti slikti diferencēts. Tomēr var izdalīt šādus reģionus: dzemdes kakla, krūšu kurvja, sakodālā sakrālā, sakrālā un caudālā.

Kopumā tam ir 50 skriemeļi, skaitlis var mainīties, ņemot vērā, ka astei var būt no 30 līdz 35 skriemeļiem. Viņiem ir rudimentāras ribas, kas iet gar ķermeni.

Āda

Ādu veido epiderma, derma, cilia, papillas un dziedzeru audi. Tās funkcija ir aizsargāt dzīvnieku no apkārtējās vides izmaiņām un aizsargāt to no infekcijām, ko izraisa daži mikrobi.

Turklāt tas veicina ķermeņa ūdens līmeņa regulēšanu un atkritumu atkritumu izvadīšanu. Atšķirībā no salamandrām, axolotls neizdala ādu.

Aksolotļiem ir 4 gēni, kas saistīti ar ādas pigmentāciju. Kad notiek mutācijas, tiek izveidoti dažādi toņi, kas pigmentē ādu.

Ādas dabiskajai krāsai raksturīgs tumšs fons, parasti brūngani zaļš, ar plankumiem olīvu, dzeltenā, oranžā vai krēmkrāsā. Tie ir sadalīti pa vidu, un katrā pusē var izveidot skaidru līniju.

Četri mutantu toņi ir leicistiski, gaiši rozā tonī ar melnām, albīno acīm, kur āda un acis ir zeltainas, aksantiskas, pelēka ķermeņa un melnas un melanoīdas acis, pilnīgi melna āda, bez plankumiem.

Turklāt šai sugai ir ierobežota spēja mainīt savas ādas krāsu, tādējādi spējot sevi maskēties vidē, kurā tā sastopama.

Fin

Ambystoma mexicanum ir astes spura, kas stiepjas no galvas aizmugures līdz tās astes galam, kur tā kļūst par asti.

Galva

Tās galva ir plaša un apakšējā daļā atdalīta no stumbra. Viņu acis atrodas abās galvas pusēs, tās ir maza izmēra un tām nav plakstiņu. Viņu redzamības lauks nav plašs, tāpēc medībām tie ir atkarīgi no pieskāriena un ožas sajūtām.

Mutes dobumā viņiem ir vestiģiski zobi, kas nav īpaši redzami. Viņiem ir arī nāsis, jo viņi var elpot ar plaušām.

Ekstremitātes

Aksolotlam ir īsas un mazattīstītas ekstremitātes. Priekšējām kājām ir 4 kāju pirksti, bet aizmugurējām kājām - 5.

Kanalizācijas

Tēviņus ir viegli identificēt, jo viņu kloaca ir pietūkušies, jo tie ir pilni ar papillēm. Mātītēm nav attīstījušies kloāžas dziedzeri.

Žaunas

Īpaša šīs sugas īpašība ir tās ārējās žaunas, kuras tā izmanto, lai elpotu, atrodoties ūdenī. Šis orgāns sastāv no trim kātu pāriem, kas rodas galvas aizmugurē.

Šīs filiāles ir pārklātas ar pavedieniem, kas palielina virsmu, kur notiek gāzes apmaiņa.

Plaušu maisiņi

Šie maisiņi nav attīstījušies kā plaušas. Tomēr tos mēdz elpot dažās reizēs, kad tie nonāk gaisā.

Taksonomija

Dzīvnieku valsts.

Subkingdom Bilateria.

Infra-karaļvalsts deuterostomija.

Čordatas patvērums.

Mugurkaulnieku subfilums.

Tetrapoda superklase.

Abinieku klase.

Pasūtīt Caudata.

Ģimene Ambystomatidae

Lielākajā daļā šīs ģimenes locekļu sauszemes pieaugušie iziet metamorfozi. Viņu ķermenis un kājas ir iegarenas, savukārt galva ir īsa un noapaļota. Viņi parasti dzīvo zem lapām vai urvos, atgriežoties dīķī, lai vairotos.

Izņēmums ir Ambystoma mexicanum sugas, kas saglabā kāpuru stāvokli pat kā pieaugušie, jo metamorfoze tajās nenotiek. Tādēļ tā dzīvi galvenokārt pavada ūdenī.

Ģints Ambystoma

Šai ģintī ietilpstošajām sugām parasti ir žaunas un vairoties ūdenī, kur tās dēj olas redzamās grupās. Tie ir skaidri un nepastāvīgi, tāpēc katru to attīstības pakāpi var skaidri novērot.

Vispazīstamākās sugas ir Ambystoma mexicanum un Ambystoma tigrinum.

Suga Ambystoma mexicanum

Izmiršanas briesmas

Starptautiskā dabas aizsardzības savienība aksolotlu pašlaik klasificē kā kritiski apdraudētu paraugu. Populācijas, kas brīvi apdzīvo, ir ļoti maz.

1998. gadā uz kvadrātkilometru bija apmēram 6000 īpatņu, un līdz 2014. gadam bija tikai 36 axolotls uz km2.

Cēloņi

Ir vairāki faktori, kas tieši saistīti ar šīs sugas populācijas samazināšanos. Starp tiem ir:

- Ezeru un kanālu piesārņojums un žāvēšana. Tas ir pārveidojuma rezultāts, kurā cieta vide, sakarā ar pilsētplānošanas izveidi ap šīm ūdenstilpnēm. Vēl viens aspekts, kas pasliktina situāciju, ir tāds, ka ūdeņos tiek izvadīts liels daudzums ķīmisku vielu, kas maina ekosistēmu.

-Aksolotla sagūstīšana medicīniskiem un zinātniskiem mērķiem. Tradicionālajā medicīnā tiek ražoti axolotl sīrupi, kurus izmanto elpceļu slimību ārstēšanā.

Papildus tam gaļai ir augsts uzturvērtības līmenis, tāpēc to patērē vietējā un reģionālā mērogā. Arī aksolotls tiek notverts un pārdots kā mājdzīvnieks.

- tādu eksotisku zivju sugu kā karpas un tilapijas ieviešana. Šīs zivis ir palielinājušas savu populāciju, konkurējot ar aksolotlu pārtikai. Turklāt šīs zivis ir Ambystoma mexicanum dabiskie plēsēji.

- Lielā skaitā jaunas sugas veido populāciju, kas ir sagūstīta vai priekšgājēja. Līdz ar to tiek ietekmēta sugas pavairošana.

Saglabāšanas stratēģijas

Visas darbības ir saistītas ar Xochimilco ezera vides kontroli. Tie ietver tādu projektu īstenošanu, kuru mērķis ir bioloģiskā sanācija un biotopu atjaunošana.

1989. gadā tika veikts "Xochimilco ekoloģiskās glābšanas plāns", kas ietver šīs Meksikas sugas saglabāšanas projektu.

Turklāt dažas starptautiskās valdības, piemēram, Apvienotā Karaliste, atbalsta dažādus projektus, piemēram, "Nacionālais rīcības plāns Axolotl pārvaldībai un saglabāšanai Xochimilco".

Pašlaik ekspertu grupa ierosina izveidot «Refugio chinampa» Xochimilco ezerā. Paredzēts novērst pesticīdu un ķīmisko mēslojumu izmantošanu laukos pie ezera. Papildus tam tā būtu patvēruma vieta axolotl.

Izplatība un dzīvotne

Aksolotls ir endēmiska suga, kas pašlaik apdzīvo Xochimilco ezera kanālus Meksikā. Pagātnē tas bija arī Chalco ezerā, kas tika mākslīgi nosusināts, lai novērstu plūdus. Tā rezultātā axolotl pazuda no šī dzīvotnes.

Xochimilco ezers atrodas 2220 metrus virs jūras līmeņa. Pašreizējā situācija ir pārvaldības rezultāts, kam gadu desmitiem ilgi ir bijusi augsne, kas robežojas ar šo nozīmīgo Meksikas dabas resursu.

Tam ir 207 kilometri kanālu, papildus astoņiem maziem ezeriem un diviem sezonāliem mitrājiem. 20. gadsimta sākumā šo sistēmu baroja vairāki avoti, taču šodien notekūdeņi tiek novadīti ezerā, daži tiek apstrādāti, bet citi ne.

Lietus sezonā, kas notiek no jūnija līdz oktobrim, nokrišņu daudzums veicina arī šī ezera barošanos.

No dienvidiem uz ziemeļiem šai ūdenstilpei ir ūdens strāva, kas pārvietojas ar ātrumu 4m / h. Uz dienvidiem ir daži dabiski avoti, un ziemeļos ir vieta, kur izplūst notekūdeņi.

Jaunākie pētījumi

Ir veikti pētījumi, lai uzzinātu aksolotla lokālo izplatību, ņemot vērā tā ekoloģisko nišu. Tas ir paredzēts, lai noteiktu sugai piemērotas teritorijas un ņemtu tos vērā to saglabāšanā.

Šo pētījumu rezultāti norāda, ka Ambystoma mexicanum atrašanās vieta ir ierobežota ar vienpadsmit vietām sešās izolētās, reducētās un izkliedētās vietās. Tie galvenokārt atrodas tajos apgabalos, kur zemi izmanto tradicionālajai lauksaimniecībai.

Dzīves cikls

Dzīves cikls lielākajā daļā abinieku ietver posmu ūdenī un vēl vienu uz sauszemes. Starp šīm fāzēm dzīvnieks iziet metamorfozes procesu. Tomēr Ambystoma mexicanum ir šī noteikuma izņēmums.

Tas notiek tāpēc, ka suga ir neotēniska, tāpēc tā nemetamorfozē. Tāpēc viss tā dzīves cikls notiek ūdenī. Aksolotls savā attīstībā iziet vairākus posmus. Daži no tiem ir:

Olu apaugļošana

Pēc apaugļošanas olšūna sasniedz aptuveni 2 mm. Šajā posmā olas tiek aplokšotas želejveida sekrēcijā, kas satur spermu. Šajā fāzē parādās pirmā šķelšanās grope un dzīvnieku pole.

Embrijs

Pēc 21 stundas pēc mēslošanas tas jau ir blastula ar gludu virsmu. Kad embrijs ir trīs dienas vecs, embrijam ir iegarena forma. Neironu krokas ir ieskicētas, sāk celties virs galvas zonas.

Organisko struktūru veidošanās sākums

No 3 līdz 4 dienām embrijā neironu krokas mugurkaula zonas drošinātāja līmenī. Attīstās optiskie pūslīši. Neliels pietūkums norobežo nākotnes reģionu, kur tiks izvietotas žaunas. Ektodermā parādās depresija, kas kļūs par ausu primordiju.

Acu un žaunu izskats

Kad ir pagājušas 10 dienas, žaunas ir iegarenas, un tām jau ir četri pavedienu pāri. Mute ir skaidrāk iezīmēta, un pumpuri jau izliekas no ekstremitātēm.

Perēšana

12. dienā sākas izšķilšanās process, kurā kāpurs veic konvulsīvas kustības, tādējādi noplicinot želatīna slāni, kas to pārklāja.

Kāpuri

Jaunie tiek uzskatīti par kāpuriem, sākot no izšķilšanās līdz četriem mēnešiem. Viņiem ir tikai galva, žaunas un ķermenis. Ekstremitātes attīstīsies vēlāk.

Pirmajās dzīves stundās Ambystoma mexicanum kāpuri barojas ar dažām dzeltenuma paliekām, bet pavisam drīz viņiem vajadzēs mikroaļģes, piemēram, spirulīnu, lai viņi varētu sevi barot un turpināt attīstīties.

Jauniešu un pieaugušo izaugsme

Kad aksolotls ir no 4 līdz 12 mēnešiem, tas tiek uzskatīts par jaunekli, parasti tas jau ir apmēram 5 centimetri. Sākot no 13 mēnešiem, sākas posms, kurā tā var vairoties, jo tā ir seksuāli nobriedusi.

Pavairošana

Aksolotļos dzimumbriedums tiek sasniegts aptuveni gada vecumā. Neskatoties uz to, viņi saglabā savu kāpuru stadiju. Tieši no tā brīža atšķirības starp vīriešiem un sievietēm ir visvairāk pamanāmas.

Viena no šīm pazīmēm ir iekaisums kloakas rajonā. Vīriešiem kloāžas dziedzeri ir iekaisuši, turklāt tie parasti ir plānāki un ar garāku asti nekā mātītēm.

Aksolotla seksuālā aktivitāte parasti notiek naktī. Lai pārojas, tēviņi neuzrāda izturēšanos, kas saistīta ar laipnību.

Mēslošana

Lai sāktu apaugļošanas procesu, vīriešu kārtas axolotl nonāk uz klints vai smiltīm un caur kloāžas atveri izdala želatīnu saturošu maisiņu, kas satur spermu. Šī granulētā aploksne ir pazīstama kā spermatophore. Lai tos apaugļotu, mātīte pieiet pie maisa un absorbē to caur savu kloacu.

Oviposition laikā mātīte dēj no 100 līdz 600 olām. Dēšanas amplitūda ir mainīga, tā varētu būt no 40, kas atbilst jaunai mātītei, līdz 1500, ko ievietotu pieauguša sieviete. Tas var notikt vienā laidienā vai ar dažām dienām starp tām.

Šo apaugļoto olu inkubācijas laiks būs atkarīgs no vides temperatūras, kurā tās atrodamas. Tomēr parasti tas ir no 12 līdz 18 dienām.

Olai ir trīs kārtas, un tās membrāna ir caurlaidīga. Šī īpašība varētu kaitēt tās attīstībai, jo, ja ūdens, kurā tas atrodams, satur toksiskas vielas, olšūna tos varētu absorbēt.

Pēc izšķilšanās mazie aksolotļi var kļūt par vieglu laupījumu zivīm, kurām ir vienāds biotops.

Neotenija

Axolotls visu mūžu uztur kāpuru formu. Šī iemesla dēļ viņiem piemīt neotenija, kas nozīmē, ka viņi sasniedz dzimumbriedumu, neveicot metamorfozes procesu.

Šīs metamorfa mazspējas iemesls ir vairogdziedzera deģenerācija, izraisot zemu tiroksīna līmeni. Šis hormons ir tieši saistīts ar šo morfoloģisko izmaiņu procesu.

Neoteny ir ļāvis axolotl izdzīvot ūdens vidē, kur, iespējams, ir maz pārtikas. Šim reprodukcijas veidam kāpuru stadijā ir nepieciešama zemāka pārtikas kvalitāte un daudzums, atšķirībā no tā, ja tas būtu pieaugušs un sauszemes dzīvnieks.

Barošana

Aksolotļi ir stingri gaļēdāju dzīvnieki. Tomēr tā uzturs var mainīties, attīstoties. Pirmajās dzīves dienās kā kāpuri viņi barojas ar dzeltenuma maisa un mikroaļģu paliekām. Tad apmēram 11 dienas pēc izšķilšanās jaunieši varēs ēst kukaiņu kāpurus.

Savā mazuļu stadijā šis dzīvnieks dod priekšroku maziem gaļas un tārpu gabaliņiem. Pēc pieaugušo cilvēku uzturs ir daudz daudzveidīgāks, un to veido nesen izšķīlušās zivis, upju omāri, ūdens tārpi, piemēram, tubifex, un pieaugušās zivis, piemēram, charal.

Viņi ēd arī gliemežus, kukaiņus, varžu kurkumus, gliemežus, moskītu kāpurus un tārpus.

Tā kā viņiem ir slikta redze, axolotls atrod savu laupījumu, izmantojot viņu ožas sajūtu. Viņi arī spēj noteikt elektriskos laukus un dažus ķīmiskos signālus, tādā veidā viņi uztver vidi un atklāj dzīvniekus, kurus viņi gatavojas ēst.

Gremošanu

Ambystoma mexicanum ir skrimšļveida struktūras uz abām gaumēm, kas to sakaltās formas dēļ pilda zobu funkcijas. Šajā konkrētajā gadījumā viņi tos izmanto tikai, lai sagrābtu savu laupījumu, bet nevis to košļāt vai saplēst.

Gremošanas trakts ir īss un taisns. Lai ēst, šis dzīvnieks atver muti un absorbē barību kopā ar ūdeni un norij to veselu. Mutes dobumu no barības vada atdala ar sfinkteru, kas līdzīgs glottis.

Gremošanas process sākas barības vadā, kas izdala sava veida gļotas, kas satur gremošanas enzīmus. Tam ir arī cilijas, kas norītu pārtiku caur barības vadu ved uz kuņģi. Šis gremošanas orgāns ir dziedzeru tipa un tam ir 3 zonas: kardija, funduss un pylorus.

Kuņģī pārtikas gremošana turpinās. Tad pārtikas masa nonāk zarnās, kuras aksolotlā ir īss.

Gremošanu papildina dažādi orgāni, piemēram, aknas un aizkuņģa dziedzeris. Aknas ir lielas un darbojas kā olbaltumvielu un tauku noliktava. Tas arī izdala žults šķidrumus, kurus tas ievada tievās zarnas sākotnējā daļā, palīdzot taukiem sagremot.

Aizkuņģa dziedzeris, kas atrodas starp kuņģi un zarnu, ražo aizkuņģa dziedzera enzīmus, kas piedalās gremošanā. Žults šķidrumi un aizkuņģa dziedzera enzīmi izdalās tievās zarnas priekšējā daļā, kur notiek barības vielu uzsūkšanās.

Atsauces

1. Vikipēdija (2018). Aksolotls. Atgūts no vietnes en.wikipedia.org.
2. ITIS (2018). Ambystoma mexicanum. Atgūts no itis.gov.
3. Majchrzak, A. (2004). Ambystoma mexicanum. Dzīvnieku daudzveidības tīmeklis. Atgūts no Animaldiversity.org.
4. Horacio Mena González, Erika Servín Zamora (2014). Pamata rokasgrāmata Xochimilco axolotl (Ambystoma mexicanum) aprūpei nebrīvē. Meksikas Nacionālā autonomā universitāte. Atgūts no ibiologia.unam.mx.
5. Erika Servīna Zamora (2011). Uzturēšanas rokasgrāmata nebrīvē un veterinārās zāles, kas piemērotas xochimilco axolotl (Ambystoma mexicanum) Chapultepec zooloģiskajā dārzā. Meksikas autonomā universitāte. Akadēmija. Atgūts no academia.edu.
6. Luis Zambrano, Paola Mosig Reidl, Jeanne McKay, Richards Griffiths, Brad Shaffer, Oskars Flores-Villela, Gabriela Parra-Olea, David Wake (2010). Ambystoma mexicanum. IUCN apdraudēto sugu sarkanais saraksts. Atgūts no iucnredlist.org.
7. Vides un dabas resursu ministrija, Meksikas valdība. (2018). Meksikas axolotl, super apdāvināta būtne. Atgūts no gob.mx.
8. Luis Zambrano, Elsa Valiente, M. Jake Vander Zanden (2010). Vietējā aksolotla (Ambystoma
9. mexicanum) un divas eksotiskas zivis: karpas (Cyprinus carpio)
10. un tilapija (Oreochromis niloticus) Xochimilco,
11. Mehiko. Springera zinātne. Atgūts no jakevzlab.net.
12. Viktorija Kontrerase, Enriks Martīnezs-Meijers, Elsa Valiente, Luiss Zambrano (2009). Nesenā samazināšanās un iespējamā izplatība Meksikas mikroendemiskās aksolotlas (Ambystoma mexicanum) pēdējās paliekas apgabalā. Zinātne tieša. Atgūts no vietnes sciencedirect.com.
13. Džordžs M. Malačinskis (2015). Meksikas aksolotls, Ambystoma mexicanum: tā bioloģija un attīstības ģenētika, un tā autonomie šūnas letāli gēni. Oksfordas akadēmiskais. Atjaunots no acade.oup.com.
14. Hils, MA (2018). Embrioloģijas aksolotla attīstība. Embrioloģija.med. Atgūts no embrioloģijas.med.unsw.edu.au.
15. Larsons, Alans (1996). Ambystomatidae. Kurmis Salamanders. Web projekts Dzīves koks. Atgūts no tolweb.org.
16. Haas BJ, Whited JL (2017). Attīstība Axolotl ekstremitāšu reģenerācijas dekodēšanā. NCBI. Atgūts no ncbi.nlm.nih.gov.