BAROJOŠS AGARS: PAMATOJUMS, SAGATAVOŠANA UN LIETOJUMS - BIOLOĢIJA - 2025

Uzturvielu agars ir neselektīvie vidēja un nav starpība cieta kultūra. Šajā barotnē aug visu veidu baktērijas, kuras nav pieprasītas no uztura viedokļa.

Tas ir vienkāršs līdzeklis, un, neraugoties uz tā nosaukumu, tas satur zemāku uzturvērtību salīdzinājumā ar citiem līdzīgiem līdzekļiem, piemēram, Brain Heart Infusion Agar vai Trypticase Soy Agar.

Koloniju skaits uz uzturvielu agara

Tās lietderība laboratorijā ir ļoti dažāda. To galvenokārt izmanto sugu subkultivēšanai, celmu uzturēšanai, koloniju skaitīšanai, kā pamatu asins agara sagatavošanai.

Tāpat, ņemot vērā gaiši smilškrāso krāsu, var izdalīt dažu baktēriju celmu radītu pigmentu ražošanu, piemēram, Pseudomonas aeruginosa zaļgano pigmentu, Serratia marcescens ražoto ķieģeļsarkano pigmentu istabas temperatūrā, Staphylococcus zeltaini dzelteno pigmentu. aureus, cita starpā.

Turklāt tas ir viens no lētākajiem augšanas līdzekļiem, kāds atrodams tirgū.

Pamats

Kā jau minēts iepriekš, tā ir ļoti vienkārša barotne, kuras pamatā ir barības vielu nodrošināšana baktēriju augšanai bez ierobežojumiem un bez sarežģītām interpretācijas reakcijām.

Tā kā barotne ir caurspīdīga, tā ir ideāli piemērota koloniju skaitīšanai ar dziļuma sēšanas metodi.

Sastāvs

Tas sastāv galvenokārt no gaļas ekstrakta vai rauga ekstrakta, peptoniem vai aizkuņģa dziedzera želatīna sagremošanas, agara agara, nātrija hlorīda un destilēta ūdens.

Gaļas vai rauga ekstrakts un peptoni ir svarīgi oglekļa un minerālu (slāpekļa, fosfora un sēra) avoti, kurus baktērijas izmantos kā enerģijas un augšanas faktoru avotu.

Tāpat agara agars ir visu cieto barotņu bāze, aizstājot želatīnu, kas bija pirmais bāzes savienojums, ko Roberts Kohs izmantoja, lai barotnei nodrošinātu stabilu konsistenci.

Agars ir polisaharīds, kas sastāv no galaktozes, galaktomannāna, agarozes un agaropektīna. Tas uzsilda 40 ° C un kūst tuvu 100 ° C.

Savukārt nātrija hlorīds nodrošina barotni ar osmolaritāti, kas nepieciešama baktēriju attīstībai.

Visbeidzot, ūdens kalpo liofilizēto savienojumu hidratēšanai un izšķīdināšanai. Jāizmanto destilēts ūdens, kas noregulēts līdz neitrālam pH. Krāna ūdeni nevajadzētu lietot, jo tas satur kalciju un magniju, kas vidē var reaģēt ar fosfātiem un veidot nešķīstošus sāļus.

Sagatavošana

Vienam litram uzturvielu agara ir jāsver 31 g dehidrētās barotnes. Ievieto to kolbā un izšķīdina litrā destilēta ūdens. Pēc 5 minūšu stāvēšanas uzkarsē virs siltuma avota un nepārtraukti samaisa, līdz vārās 1 vai 2 minūtes.

Barotnes sagatavošana.

Pēc tam kolbu ievieto autoklāvā un 20 minūtes sterilizē 121 ° C temperatūrā.

Sterilizācija autoklāvā

Laika beigās to noņem no autoklāva un pasniedz sterilos Petri trauciņos, izmantojot laminārās plūsmas pārsegu vai Bunsena degli.

Ja Petri trauki ir vienreizlietojami (plastmasas), barotne jāsadala, kad agara temperatūra ir aptuveni 50 ° C, lai novērstu to deformāciju pārmērīga karstuma ietekmē.

Ļauj sacietēt un glabā uz apgriezta plāksnes turētāja un līdz lietošanai atdzesē 2–8 ° C temperatūrā.

Pirms sēšanas plāksnēm jābūt atlaidinātām. Uzturvielu agara plāksnes nedrīkst lietot, ja tās ir piesārņotas vai dehidrētas.

Sagatavotās barotnes pH jākoriģē līdz 7,3 ± 0,2.

Lietojumprogrammas

Tā ir vienkāršākā barotne, ko izmanto mikrobioloģijas laboratorijā. Tās sastāvs ir lieliski piemērots baktēriju, kas nav prasīgas, augšanai.

Galvenie tā lietošanas veidi ir izskaidroti turpmāk

Kā pamats asiņu agara pagatavošanai

Šo barotni dažreiz izmanto kā bāzi asins agara pagatavošanai, tomēr tā nav visbiežāk izmantotā bāze.

Stimulējiet sporas veidojošo baktēriju sporulāciju

Šī barotne ir īpaši noderīga, lai stimulētu sporas veidojošo baktēriju, piemēram, Bacillus sp.

Šim nolūkam iesēj Bacillus ģints celmu un 24 stundas inkubē aerobiozē 37 ° C temperatūrā. Kad kolonijas ir izaugušas, plate tiek pakļauta temperatūras stresam, tas ir, krāsns temperatūru paaugstina līdz 44 ° C un atstāj vēl uz 24 stundām vai uz 24 stundām ievieto ledusskapī.

Laika beigās kultūras uztriepes tiek izgatavotas un iekrāsotas ar Gram vai Shaeffer-Fulton sporu traipu. Tajās tiks novērotas baciles ar endosporām (sporas baciļa iekšpusē) un eksosporas (sporas ārpus bacilas).

Celmu uzturēšana

Dažās pētniecības vai universitātes mācību atbalsta laboratorijās ir nepieciešams pēc iespējas ilgāk saglabāt dzīvotspējīgas baktērijas, kas ir klīniski nozīmīgas, lai baktēriju banku (bakterioteca) izmantotu pētniecības darbam vai mācību prakses sagatavošanai, ja Studenti iemācīsies manipulēt un identificēt šos mikroorganismus.

Šim nolūkam var izmantot uzturvielu agaru, kā arī smadzeņu sirds infūzijas agaru. Pagatavo agaru, ielej mēģenēs ar bakelīta vāku un noliec uz pamatnes tā, lai agars sacietētu, veidojot bloku apakšā un slīpi uz virsmas (flautas knābis).

Katrā mēģenē ir etiķete ar baktēriju nosaukumu, kas jāsēj, un datumu. Katra baktērija tiks iesēta uz sliekšņa un inkubēta 24 stundas.Kad kolonijas ir izaugušas, mēģenes tiek glabātas istabas temperatūrā.

Bakterioteka jāatjauno no 1 līdz 3 mēnešiem, lai izvairītos no barotnes inficēšanās un dehidratācijas, kā arī no baktēriju nāves.

Šādā veidā var uzturēt tikai baktērijas, kas nav izvēlīgas.

Koloniju skaits

Kaut arī pastāv speciāli koloniju skaitīšanas paņēmieni, piemēram, standarta agars, barības vielu agaru var izmantot šim nolūkam, vai nu sējot virsmu ar drigalski lāpstiņu, vai arī veicot dziļumu. Šī iemesla dēļ tas ir ļoti noderīgs pārtikas un ūdens mikrobioloģiskajā analīzē.

Diagnostikas testu vadīšana

Tā kā tā ir barotne, kas nesatur asinis vai citas piedevas, tas ir ideāls, lai ņemtu kolonijas, kas izaudzētas uz šīs barotnes, lai veiktu katalāzes testu.

Tāpat, ņemot vērā gaišo krāsu, ir paredzēts veikt oksidāzes testus tieši ar iesēta agara laukumu bez traucējumiem.

Mezofilo aerobu atgūšana no atpūtas sālsūdeņiem (pludmales)

Barības vielu agars, kas sagatavots ar 10% jūras ūdeni, ir noderīgs, lai novērtētu mezofīlijas aerobus pludmales ūdeņos.

Tādā veidā var novērtēt reālo piesārņojuma līmeni, kāds ūdeņiem ir ar šiem mikroorganismiem, jo ​​šāda veida paraugos rezultāti pārklājas, ja tiek izmantotas parastajā veidā sagatavotas barotnes.

To parādīja Kortess un citi. 2013. gadā pētniecības darbā.

Tas izskaidrojams ar pēkšņām izmaiņām, kas notiek baktērijās, pārejot no paaugstināta sāļuma uz zemu sāls vidi, tāpēc mikroorganismi nonāk letarģijas stāvoklī, kurā tie ir dzīvotspējīgi, bet nav kultivējami.

Atsauces

1. "Barojošs agars." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2016. gada 13. septembris, 20:33 UTC. 2018. gada 29. decembris, 21:04 lv.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Beilija un Skota mikrobioloģiskā diagnostika. 12 ed. Argentīna. Redakcija Panamericana SA
3. Konemans E, Allens S, Janda V, Šrekenbergers P, Vins V. (2004). Mikrobioloģiskā diagnostika. (5. izd.). Argentīna, Panamericana SA redakcija
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ar jūras ūdeni sagatavotu barotņu ietekme uz veselības rādītājiem jūras ūdeņos kūrortos Chichiriviche, Falcón štatā, Venecuēlā. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M un Cardoso M. Ūdens mikrobioloģiskā kvalitāte devu ievietošanai cūkām. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. Garsija P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktiskā klīniskā mikrobioloģija. Kadisas Universitāte, 2. izdevums. UCA publikāciju dienests.