MAKKONIJA AGARS: PAMATOJUMS, SAGATAVOŠANA UN LIETOJUMS - BIOLOĢIJA - 2025

MacConkey agars ir cieta vide, kas ļauj ekskluzīvas izolāciju gramnegatīvām baktērijām. Šī iemesla dēļ tā ir selektīva barotne un arī ļauj atšķirt laktozes fermentāciju no nefermentējošām bacilām, kas padara to par diferencētu barotni. Tas ir viens no mikrobioloģijas laboratorijā visplašāk izmantotajiem barotnēm.

Šo barotni galvenokārt izmanto gramnegatīvu baktēriju, kas pieder Enterobacteriaceae ģimenei, ieskaitot oportūnistiskas un enteropatogēnas sugas, izolēšanai.

Makkonkija agars ar divu veidu baktērijām. Kreisās puses laktozes raudzēšanas kolonijas, labās puses nelaktozes raudzēšanas kolonijas.

To var izmantot arī citu zarnu trakta baktēriju izolēšanai, kas dzīvo kuņģa-zarnu traktā, bet nepieder pie Enterobacteriaceae, piemēram, Aeromonas sp, Plesiomonas sp, cita starpā.

Visbeidzot, tas var izolēt citus ne-glikozes fermentējošus gramnegatīvus baciļus, kas atrodami vidē, ūdenī vai augsnē, bet kas dažreiz var būt oportūnistiski patogēni, piemēram, Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia.

Pamats

Makkonkija agars

Šīs informācijas nesēja pamats ir izskaidrojams ar tā sastāvdaļu aprakstu, jo katram no tiem ir mērķis, kas nosaka tā īpašību.

Žults sāļi un kristālviolets

Šajā ziņā MacConkey agaram ir sarežģīts sastāvs. Pirmkārt, tas satur žults sāļus un kristālvioleto.

Šie elementi ir atbildīgi par grampozitīvo baktēriju un dažu gardo gramnegatīvo baktēriju augšanas kavēšanu. Tas savukārt veicina gramnegatīvu bacilu attīstību, kurus šīs vielas neietekmē. Tāpēc tas ir selektīvs līdzeklis.

Tiek teikts, ka tas ir nedaudz selektīvs salīdzinājumā ar citiem barotnēm, kas kavē arī grampozitīvo baktēriju un arī vairuma gramnegatīvo baktēriju augšanu.

Peptoni, polipektoni un laktoze

Tas satur vielas, kas nodrošina nepieciešamās barības vielas mikroorganismiem, kas attīstās šajā vidē, piemēram, peptonus, polipektonus un laktozi.

Laktoze ir galvenais faktors, lai barotne būtu diferenciāla barotne, jo mikroorganismiem, kuriem ir iespēja fermentēt laktozi, izveidosies spēcīgas rozā kolonijas.

Dažas baktērijas lēnām vai vāji var fermentēt laktozi, attīstot gaiši rozā kolonijas un paliekot pozitīvas laktozes ziņā.

Tie, kas neraudzē laktozi, kā enerģijas avotu izmanto peptonus, ražojot amonjaku, sārminot barotni. Šī iemesla dēļ izcelsmes kolonijas ir bezkrāsainas vai caurspīdīgas.

PH indikators

Krāsas maiņa tiek panākta, izmantojot citu būtisku savienojumu, kāds ir Makkonkija agaram. Šis savienojums ir pH indikators, kas šajā gadījumā ir neitrālā sarkanā krāsā.

Laktozes fermentācija rada jauktu skābju veidošanos. Viņi paskābina barotni līdz pH zem 6,8.

Tas izraisa pH indikatora pagriešanos pret dziļu rozā nokrāsu. Krāsas intensitāte var mainīties atkarībā no galīgā pH.

Destilēts ūdens, nātrija hlorīds un agars

No otras puses, tas satur destilētu ūdeni un nātrija hlorīdu, kas nodrošina vidēju mitrināšanu un osmotisko līdzsvaru. Visbeidzot, barotne satur agaru, kas ir bāze, kas nodrošina cietās barotnes konsistenci.

Sagatavotajai MacConkey agara barotnei jābūt ar galīgo pH, kas noregulēts līdz 7,1 ± 0,2.

Sagatavošana

Vienam litram MacConkey agara jāsver 50 g dehidrētās barotnes, pēc tam ievieto kolbā un izšķīdina vienā litrā destilēta ūdens. Pēc 10 minūšu stāvēšanas tas tiek uzkarsēts, nepārtraukti maisot, līdz vārās 1 minūti.

Pēc tam kolbu ievieto autoklāvā un 20 minūtes sterilizē 121 ° C temperatūrā. Laika beigās to izņem no autoklāva un ļauj atdzist, līdz tā sasniedz 45 ° C temperatūru, lai vēlāk pasniegtu sterilos Petri traukos lamināta plūsmas pārsega iekšpusē vai Bunsena degļa priekšā.

Ļauj sacietēt un uzglabā apgrieztā plākšņu turētājā un līdz lietošanai atdzesē ledusskapī 2–8 ° C temperatūrā.

Lai iegūtu MacConkey agaru, kas kavē proteus ģints radīto svīšanas efektu, izmanto MacConkey agaru ar zemu sāls saturu.

Parastā Makkonkija agara lietojumi

MacConkey Agar ir iekļauts visos barotņu komplektos, kas sakārtoti laboratorijā saņemto klīnisko paraugu sēšanai. Tas ir noderīgs arī pārtikas mikrobioloģijā un vides mikrobioloģijā.

Gramnegatīvo stieņu dažādība, kas aug šajā barotnē, izsaka fenotipiskas īpašības, kas palīdz veikt paredzamu attiecīgās sugas diagnozi. Piemēram, koloniju lielums, krāsa, konsistence un smarža ir dažas pazīmes, kuras var vadīt.

Šajā barotnē Escherichia coli, Klebsiella sp un Enterobacter sp sugas rada spēcīgas rozā kolonijas, ko ieskauj izdalītā žults zona.

Tā kā tādas baktērijas kā Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp un Hafnia sp pēc 24 stundām var parādīties bezkrāsainas vai gaiši sārtas 24–48 stundās.

Tāpat Proteus, Edwadsiella, Salmonella un Shigella ģints ražo bezkrāsainas vai caurspīdīgas kolonijas.

Citi MacConkey agara varianti

Ir arī citi MacConkey Agar varianti, kuriem ir īpaši mērķi. Tie ir minēti zemāk:

MacConkey agars ar sorbītu

Šī barotne tika izstrādāta, lai atšķirtu enteropatogēno celmu (enterohemorāģisko Escherichia coli O157: H7) no pārējiem Escherichia coli celmiem.

Šī barotne apmaina ogļhidrātu laktozi pret sorbītu. Enterohemorāģiskie E. coli celmi O157: H7 atšķiras no pārējiem, jo ​​tie neraudzē sorbītu un tāpēc tiek iegūtas caurspīdīgas kolonijas, savukārt pārējie E. coli celmi raudzē sorbītu un kolonijas ir spēcīgi rozā.

MacConkey agars bez kristālviolets un sāls

Šis agars ievērojami atšķiras no klasiskā Makkonkija agara, jo tam nav violets kristāla un var augt grampozitīvas baktērijas.

No otras puses, sāls trūkums kavē barības rašanos uz agara, ko rada daži zarnu trakta baktērijas, piemēram, Proteus ģints baktērijas, un tādējādi atvieglo visu esošo baktēriju, ieskaitot grampozitīvās baktērijas, izolāciju.

Makkonkija agars ar cefoperazonu

Šis MacConkey agara variants tika izveidots, lai sākotnēji izolētu Laribacter hongkongensis, un vēlāk tika atzīts par noderīgu Arcobacter butzleri izolēšanai. Abi ir nedaudz izliekti gramnegatīvie stieņi, kas izturīgi pret cefoperazonu.

Šīs baktērijas nesen ir saistītas ar gastroenterīta rašanos un ieguvušas caureju Āzijas un Eiropas indivīdiem, parādoties kā diviem spēcīgiem jauniem patogēniem.

Antibiotika ļauj nomāc kuņģa un zarnu trakta pavadošo floru, kas veicina šo baktēriju attīstību, neļaujot tām palikt nepamanītām, jo ​​to augšanai nepieciešamas 72 stundas.

MacConkey agars, kas pagatavots ar jūras ūdeni ar 10% v / v

Šis variants ir noderīgs fekāliju piesārņojuma baktēriju sanitāro rādītāju novērtēšanai, ieskaitot kopējo koliformu un fekālo koliformu veidošanos atpūtas sāļajos ūdeņos (pludmalēs un līčos).

Cortez et al 2013. gadā parādīja, ka šādā veidā sagatavota barotne ievērojami palielina šo mikroorganismu reģenerāciju fizioloģiskajā vidē, salīdzinot ar MacConkey agara izmantošanu, kas sagatavots ar destilētu ūdeni.

Tas ir saistīts ar faktu, ka modificētā barotne stimulē baktēriju augšanu, kuras fizioloģiski ir latentā stāvoklī "dzīvotspējīgas, bet bez barības", tāpēc parastās barotnēs tās nav reģenerējamas.

Atsauces

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Cefoperazona MacConkey agara izmantošana selektīvai Laribacter hongkongensis izolēšanai. J Clin mikrobiols. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. Makkonkija agars. Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 4. aprīlis, 18:16 UTC. 2018. gada 29. decembris, 15:22 lv.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Beilija un Skota mikrobioloģiskā diagnostika. 12 ed. Argentīna. Redakcija Panamericana SA
4. Konemans E, Allens S, Janda V, Šrekenbergers P, Vins V. (2004). Mikrobioloģiskā diagnostika. (5. izd.). Argentīna, Panamericana SA redakcija
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Ar jūras ūdeni sagatavotu barotņu ietekme uz veselības rādītājiem jūras ūdeņos kūrortos Chichiriviche, Falcón štatā, Venecuēlā. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
6. Garsija P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktiskā klīniskā mikrobioloģija. Kadisas Universitāte, 2. izdevums. UCA publikāciju dienests.