IEGREMDĒŠANAS EĻĻA: SASTĀVS, ĪPAŠĪBAS, PIELIETOJUMS - BIOLOĢIJA - 2025

Iegremdēšana eļļa ir viskozs dzidrs šķidrums, kura refrakcijas indeksa augsts. Šī iemesla dēļ to plaši izmanto mikroskopiskos novērojumos, jo tas nodrošina gaismas koncentrēšanas īpašību, kad tā iet caur mikroskopa 100X mērķi, palielinot tā izšķirtspējas jaudu.

Tas notiek tāpēc, ka starp objektīvu un uztriepi veidojas viskoza plēve, kas novērš gaismas staru izkliedi, kad tie nonāk gaisā, tādējādi koncentrējot gaismas starus parauga virzienā.

Pilinātājs ar eļļas iegremdēšanu un mikroskopā fokusēts ar 100X objektīvu, izmantojot eļļas iegremdēšanu. Avots: Pixabay.com

Iegremdēšanas eļļa tiek izmantota tikai ar mērķi 100X. Tāpēc 100X mērķi sauc arī par iegremdēšanas mērķi. Pārējie ir zināmi kā sausi mērķi. Šo objektīvu nevar izmantot bez iegremdēšanas eļļas, jo bez tā vizualizācija nebūtu apmierinoša.

Iegremdēšanas eļļas galvenā funkcija ir nodrošināt skaidrākus, asākus un precīzāk definētus attēlus, ļaujot novērot detaļas, kuras ar citiem objektīviem nebūtu iespējams.

Pirmā šim mērķim izmantotā eļļa bija anīsa eļļa, ko lietoja kopā ar pirmo Džovanni Battista Amici izveidoto iegremdēšanas lēcu. Tas tikai novērsa hromatisko aberāciju, bet nepalielināja objektīva sistēmas skaitlisko apertūru.

Tad tika izmantota ciedru eļļa, taču tai bija daudz trūkumu, kas piespieda to nelietot. Starp tiem bija tā augstā skābuma pakāpe, kas īsā laikā kaitēja mērķiem.

Pēc tam līdz sintētisko iegremdēšanas eļļu radīšanai tika izmantotas citas vielas, piemēram, ūdens un glicerīns, kuras pamazām tika rafinētas, līdz tās sasniedza pašreizējo iegremdēšanas eļļu, kas ir sarežģīts organisko vielu savienojums.

Iegremdēšanas eļļas sastāvs

Iegremdēšanas eļļu veido tādu organisko savienojumu maisījums kā terfenils, hidrogenēts terfenils, dabīgie ogļūdeņraži un polibutēni.

Iegremdēšanas eļļas raksturojums

Iegremdēšanas eļļa ir gaiši dzeltens šķidrums, nedaudz viskozs, ar raksturīgu smaržu un blīvumu no 0,92 līdz 0,99 g / cm ³ .

Iegremdēšanas eļļa nešķīst ūdenī, un tās viršanas temperatūra ir 340 ° C. Refrakcijas indekss a (n 20 ° C / D): svārstās no 1,482 līdz 1,516. Tikmēr uzliesmošanas indekss ir 110 ° C, un viskozitāte ir no 100 līdz 120 mPa.s.

Šis produkts ir pareizi jāiznīcina, jo tas ir ekotoksisks. Citiem vārdiem sakot, tas ir kaitīgs videi, galvenokārt ietekmē ūdensdzīvniekus. No otras puses, tas kairina ādu un gļotādas. Norijot, tas ir nefrotoksisks un kardiotoksisks.

Iegremdēšanas eļļa ir stabila 15 līdz 25 ° C temperatūrā, kurā tā jāuzglabā.

Iegremdēšanas eļļas pamati

Lietojot objektīvus ar lielāku palielinājumu, jāpalielina gaismas intensitāte. Tomēr daudzi gaismas stari tiek zaudēti, jo, nonākot gaisā, tie ir izkliedēti (atstarpe starp pārseguma slīdni un objektīvu), un pat daži stari ir pilnībā atspoguļoti.

Iegremdējamās eļļas refrakcijas koeficients ir līdzīgs stiklam. Tāpēc, eļļai nonākot saskarē starp 100X objektīvu un pārsegu, gaismas stari tiek koncentrēti.

Koncentrētie stari iziet cauri paraugam un asina attēlu, tas ir, palielina objekta skaitlisko apertūru un ir pareizi hromatisko un sfērisko aberāciju gadījumā.

Lietojumi vai lietojumprogrammas

Iegremdēšanas eļļa ir īpaši nepieciešama, ja ir nepieciešams novērot attēlu plašākā veidā, izmantojot augstāko palielinājuma mērķi (objektīvs 100X), lai redzētu detaļas, kas ir būtiskas diagnozes noteikšanai.

Tāpēc to plaši izmanto mikroskopiskos pētījumos dažādās jomās, piemēram: histoloģijā, citoloģijā, hematoloģijā un bakterioloģijā. Piemēram, tas ir noderīgi, lai izpētītu pacienta šūnu un audu īpašības.

To izmanto arī asins uztriepes analīzei, kur mēs vēlamies detalizēt hemoparazītu īpašības eritrocītos un ārpus tiem, kā arī Gram preparātos, lai definētu mikroorganismu morfotintorijas īpašības.

Parasti to lieto fiksētos preparātos, jo tas nav ieteicams svaigos preparātos. Tas notiek tāpēc, ka eļļas virsmas spraigums izraisa pārseguma kustību, izraisot parauga nobīdi novērošanas laikā un novērš analīzes.

No otras puses, iegremdēšanas eļļa ir noderīga ne tikai parastajā gaismas mikroskopijā: to izmanto arī kopējās iekšējās atstarošanas fluorescences (TIRFM) mikroskopos un konokālās fluorescences pielietojumos.

Pasākumi preparāta novērošanai, izmantojot iegremdēšanas eļļu

Lai apskatītu slaidu mikroskopā, priekšmetstikliņš vispirms jāfokusē ar zemākā palielinājuma mērķi, parasti 10X, ar zemu gaismas intensitāti.

Tad tas iet uz 40X objektīvu, un gaismas ceļš ir nedaudz palielināts. Ar šo palielinājumu var veikt dažas analīzes, taču, lai redzētu struktūras detaļas, nepieciešams 100x palielinājums.

Pirms pārejas uz 100X objektīvu, uz pārseguma slīdņa tiek novietota pilieniņa ar iegremdēšanas eļļu tieši tur, kur vēlaties novērot, un pēc tam mikroskopa tornītis tiek pārvietots, lai preparātā atrastu 100x objektīvu.

Gaismas intensitāte tiek regulēta (palielināta) (pārvietojot kondensatoru un atverot diafragmu). Pēc tam dažām nelielām mikrometra skrūvju kustībām (uz priekšu vai atpakaļ) perfekti jākoncentrējas, ja mikroskopā tiek izmantoti parafokālie mērķi.

Ja mēģināt koncentrēt preparātu tieši ar iegremdēšanas objektīvu, jums var būt grūtības atrast fokusu. Tā nav neiespējama darbība, taču grūtības ievērojami palielinās.

Rūpes

Lai izmantotu iegremdēšanas eļļu, jāņem vērā noteikti nosacījumi.

Kad ir veikts krāsains preparāts, piemēram, uztriepe, kas iekrāsota ar Giemsa vai Gram, pirms eļļas iegremdēšanas nogaidiet, līdz uztriepe pilnībā izžūst. Pretējā gadījumā eļļa kopā ar ūdeni veidos micellas, kas neļaus preparātu redzēt.

No otras puses, pēc preparātu partijas novērošanas, tas ir, darba dienas beigās, 100X objektīvs ir rūpīgi jānotīra, izmantojot objektīva papīru ar etanolu. Ja objektīvs tiek atstāts netīrs, eļļa uz tā nožūs, un tad to būs ļoti grūti noņemt, sabojājot redzes lauku.

Tāpat jāņem vērā, ka eļļa ir viegli uzliesmojoša un tā jāglabā prom no siltuma avotiem (šķiltavām). Ir svarīgi izvairīties no tā sildīšanas virs 65 ° C.

Visbeidzot, eļļa ir toksisks produkts. Tāpēc jāizvairās no tieša kontakta ar ādu un gļotādām, kur tas var izraisīt nelielu kairinājumu. Lai izvairītos no nelaimes gadījumiem, ir ieteicams lietot cimdus un aizsargbrilles.

Ja nonāk saskarē ar eļļu, šī vieta jānomazgā ar lielu daudzumu ūdens. Ja eļļa izšļakstās acīs, tā jāmazgā tādā pašā veidā, turot acis vaļā. Nejaušas norīšanas gadījumā papildus došanās uz tuvāko ārstu ir svarīgi norīt siltu ūdeni un izraisīt vemšanu.

Atsauces

1. "Kopējais iekšējās atstarošanas fluorescences mikroskops." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 30. decembris, 22:46 UTC. 2019. gada 14. maijs, 01:54
2. IVD. Mikroskopija Eļļas iegremdēšana. Pieejams vietnē: Lietotāji / Komanda / Lejupielādes.
3. Vides bioloģija un mikrobioloģija. Optiskā mikroskopa darbība. Pieejams vietnē: eumed.net/libros.
4. Sánchez Lera Rita María, Oliva Garsija Ninfa Rosa. Mikroskopa vēsture un tā ietekme uz mikrobioloģiju. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Pieejams: scielo.
5. Herrero J. 1. prakse: Parastā saliktā optiskā mikroskopa pamati un izmantošana. Universitat d´Alacant Pieejams vietnē: rua.ua.es/dspace
6. Šarlau - MSDS. Iegremdēšanas eļļa mikroskopijai. 2001. Pieejams: insumos-labcentral.