- Pamats un materiāli
- materiāli
- Pakāpieni
- Makroskopiskā un mikroskopiskā izmeklēšana
- Oriģinālā Fausta tehnika
- Fausta tehnika ar centrifugēšanu
- Priekšrocība
- Trūkumi
- Atsauces
Fausts metode ir metodoloģija, kas ļauj koncentrāciju dažu olu un / vai kāpuru parazītu ietverto fēcēs peldošas. To lieto, ja tiešie koproparazitoloģiskie testi ir negatīvi vai ja vēlaties iegūt tīrus paraugus bez detrīta.
Koproparazitoloģisko izmeklējumu koncentrācijas metodes ir trīs veidu: ar flotēšanu, sedimentāciju vai metodēm, kas apvieno iepriekšējās divas. Šīs metodes palielina pozitīvu rezultātu izredzes.
Izkārnījumu analīze.
Fausta metode sastāv no izkārnījumu parauga daļas sajaukšanas ar vielu, kas ir blīvāka par koncentrējamām olām vai parazītiem. Tas izraisa to, ka, tie ir mazāk blīvi, tie peld virspusē. Šķidrumu virspusē savāc un mikroskopā aplūko, lai identificētu un kvantitatīvi noteiktu.
Šo metodi izmanto helmintu olu vizualizēšanai. Tajā pašā laikā tā ir pierādījusi, ka tā ir ļoti jutīga metode Giardia lamblia, kas ir plaši izplatīta visā pasaulē, diagnosticēšanai ar plaukstošu vienšūni. Flotācijas metodes nav ieteicamas ļoti smagām parazītu olām, piemēram, plakantārpiem un trematodiem.
Parazīti ir viena no visizplatītākajām zarnu infekcijām visā pasaulē, īpaši nabadzīgās valstīs ar sliktiem sanitāriem pasākumiem. Šī iemesla dēļ diagnozei un ārstēšanai ļoti noderīgas jutīgas metodes šo parazītu identificēšanai un kvantitatīvai noteikšanai.
Pamats un materiāli
Metodes pamatā ir dažādu olu, parazītu, cistu, kāpuru un detrīta īpatnējo gravitāciju esamība, kā flotēšanas metodi izmantojot cinka sulfāta šķīdumus.
Metodes pamatojums ir parauga sajaukšana ar cinka sulfāta šķīdumu, kura blīvums ir lielāks nekā gaišākām olām, kāpuriem vai parazītiem.
Tas ļauj nogulsnēties smagākiem elementiem un vieglākiem - peldēt, kas parādās virspusējā slānī pēc paraugu centrifugēšanas.
materiāli
Konteineri fekāliju paraugu ņemšanai (Avots: Bobjgalindo, izmantojot Wikimedia Commons)
- Sagatavo cinka sulfāta šķīdumu ar blīvumu 1,18 vai 1,2 g / ml, ja paraugu iepriekš apstrādāja.
- Sagatavojiet statīvu ar iepriekš marķētām mēģenēm.
- Jums ir centrbēdzes mašīna.
- Uz rokas ir mikroskopa priekšmetstikliņi un pārklāji. Visi ir jāmarķē
- Pārliecinieties, vai lokšņu krāsošanai ir pieejams Lugol šķīdums.
- Nofiltrējiet marli.
- ir piltuves un destilēts ūdens.
- Atrodiet marķētos plastmasas vai kartona traukus.
- Arī aplikatori un 5 mm sterils rokturis.
- Šķiltavas, lai sterilizētu rokturi.
Pakāpieni
Makroskopiskā un mikroskopiskā izmeklēšana
Jebkurai izkārnījumu pārbaudei pārbaude sākas ar tā saukto paraugu "bruto pārbaudi".
Aprakstīta konsistence, krāsa, asiņu klātbūtne, gļotu klātbūtne un pieaugušo parazītu klātbūtne.
Tad mēs turpinām izkārnījumu "mikroskopisko pārbaudi", tas ir atkarīgs no metodes. Vienkāršākā ir tiešās uztriepes metode, kas ir vienkāršākā parazītu mikroskopiskās novērošanas metode.
Zarnu parazīta Gardia lamblia novērošanas fotogrāfija (Avots: Riddlemaster caur Wikimedia Commons)
Procedūra paredz nelielu parauga daudzumu novietot tieši uz priekšmetstikliņa. Ievietojiet vairākus pilienus fizioloģiskā šķīduma, kam pēc izmēra jābūt līdzīgam paraugam. Sajauc fizioloģisko šķīdumu ar izkārnījumiem, līdz veidojas viendabīgs maisījums. Ievietojiet pārsegu un pārbaudiet zem mikroskopa.
Oriģinālā Fausta tehnika
Otro procedūru veido Fausta pludiņa metode, kuras sākotnējā versija sastāv no:
1- Šim nolūkam ielieciet apmēram divus gramus fekāliju piemērotā traukā.
2 - Pievienojiet 30 ml cinka sulfāta flotācijas šķīduma, ar kuru tiek izgatavota emulsija, sajaucot šķīdumu ar fekālijām.
3 Ar metāla sietiņu izkāš otrajā traukā un pārnes mēģenē.
4 - Pievienojiet vairāk flotācijas šķīduma, līdz mēģenē veidojas menisks.
5- Uzlieciet meniskam stikla pārsegu. Ļaujiet tai atpūsties 10 līdz 15 minūtes.
6- Noņemiet pārsegu un novietojiet to uz priekšmetstikliņa, kuru pārbaudīs mikroskopā.
Fausta tehnika ar centrifugēšanu
Sākotnēji metode neizmantoja centrifugēšanu, tomēr tagad tā ir iekļauta, jo tiek iegūti labāki rezultāti. Metode ietver virkni darbību, lai panāktu pareizu procedūru, tās ir šādas:
1- Izkārnījumus mazgā ar ūdeni, labi samaisa un pēc tam filtrē ar četrās kārtās salocītu marli. Paraugu ievieto mēģenē.
2- Centrifugē un noņem supernatantu (paraugi, kas tiek turēti virs ūdens). 1. un 2. darbību atkārto, līdz supernatants ir "dzidrs".
3- Filtrētajam un centrifugētajam paraugam pievieno cinka sulfātu.
4- Tas labi sajaucas.
5- Vēlreiz centrifugējiet 1 minūti pie 2500 apgriezieniem minūtē (apgriezieni minūtē).
6- Supernatantu atgūst ar sterilu cilpu apmēram 5 mm; caurules nedrīkst kratīt.
7- Paraugu, kas atgūts no virspusējā slāņa, novieto uz priekšmetstikliņa un Lugol pilienu var nokrāsot, pārklājuma slīdni ievieto un novēro mikroskopā.
8- Tvertnes un mēģenes ir marķētas.
Priekšrocība
- Diagnostikā izmantotie elementi ir redzami tīri un bez “detrīta”, tas atvieglo lapas novērošanu un saīsina diagnozei izmantoto laiku.
- Supernatantā atgūst gan kāpurus, gan olas, gan / vai cistas.
- Tā ir ļoti zemu izmaksu metode.
- Procedūra ir ļoti vienkārša un viegli izpildāma.
- Diagnoze ir ātra un precīza.
- Tā kā nabadzīgajās valstīs ir liela parazitozes pakāpe, šīs lētās un viegli lietojamās metodes ir ideāli piemērotas šo patoloģiju diagnosticēšanai un uzraudzībai.
Trūkumi
Flotācijas šķīduma blīvums rada kāpuru saraušanos, tas ir, tie sarūk un ļoti īsā laikā var deformēties. Tas liek pārbaudītājam nekavējoties noteikt diagnozi, un apstrādātos paraugus nevar glabāt turpmākām pārbaudēm.
Tāpat kā ar visām mikroskopiskajām identifikācijas metodēm, precīzu diagnožu noteikšanai ir nepieciešams ļoti pieredzējis izmeklēšanas personāls.
Lai gan diagnozei ir acīmredzams trūkums, diagnozei nepieciešamo elementu ātro deformāciju var labot, veicot tūlītējus mikroskopiskus novērojumus.
Atsauces
- Ananias, FL (2017). Fausta metodes un spontānas sedimentācijas jutības novērtēšana giardiazes diagnozei. Kubas žurnāls par tropisko medicīnu, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Modificēta cinka sulfāta flotācijas tehnikas salīdzinošais novērtējums. Vēstnesis par klīnisko mikrobioloģiju, 7 (6), 524-528.
- Bekers, AC, Krāmers, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Izvēlēto koproskopisko metožu - sedimentācijas, kombinētās cinka sulfāta sedimentācijas-flotācijas un McMaster metodes jutīgums un efektivitāte. Parazitoloģijas pētījumi, 115 (7), 2581–2587.
- Garsija, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Parazītu laboratoriskā diagnostika no kuņģa-zarnu trakta. Klīniskās mikrobioloģijas pārskati, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Cinka sulfāta centrbēdzes flotācijas metodes modifikācija helmintu olšūnu atgūšanai formalizētās fekālijās. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.