HROMATOGRAMMA: KAM TĀ PAREDZĒTA, UN VEIDI - ĶĪMIJA - 2025

Hromatogramma ir divdimensiju grafika ieraksts iegūti no absorbējoša vidē, parādot atdalīšanu vielu ar hromatogrāfiju. Hromatogrammā veidojas redzams attēls, virsotnes vai plankumi, kas atspoguļo maisījuma sastāvdaļu fizisko atdalīšanos.

Apakšējais skaitlis ir hromatogramma ar trim pīķiem A, B un C no trim parauga komponentiem, kas atdalīti ar hromatogrāfiju. Tiek novērots, ka katram no trim pīķiem ir atšķirīgs augstums un atrašanās vieta uz hromatogrammas laika ass.

Tipiska hromatogramma. Avots: Heliagon, no Wikimedia Commons

Ordinātu vai Y ass reģistrē signāla intensitātes informāciju (šajā gadījumā milivoltos mV). Atkarībā no detektora attēlo vielas vai maisījuma atsevišķas sastāvdaļas dažu fizikālo īpašību ierakstus.

Pīķa augstums ir proporcionāls komponenta koncentrācijai, kas optimālā sistēmā atdalīta no parauga. Tā, piemēram, ir viegli iztēloties, ka komponenta B proporcija ir lielāka nekā A un C.

Uz abscisas vai X ass tiek parādīts parauga vai maisījuma sastāvdaļu aiztures laiks. Tas ir laiks, kas paiet no parauga iesmidzināšanas līdz tā apstāšanās brīdim, jo ​​tas katrai tīrajai vielai ir atšķirīgs.

Kam paredzēta hromatogramma?

Tas ir visa hromatogrāfijas procesa galīgais ieraksts. No tā tiek iegūti parametri, kuriem ir analītiska interese. To var iegūt kā elektronisku datni, izdrukātu histogrammu vai uz datu nesēja; piemēram, uz papīra.

Y asi ģenerē signāla vai intensitātes reakcijas detektori, piemēram, spektrofotometri. Svarīga ir iegūto virsotņu vai plankumu laika optimāla analīze; lielums, atrašanās vieta, krāsa, starp citiem aspektiem.

Hromatogrammu analīzē parasti ir jāizmanto kontroles vai standarti, vielas ar zināmu identitāti un koncentrāciju. Šo kontroļu analīze ļauj noteikt, salīdzinot ar raksturīgajiem izmeklētā parauga sastāvdaļu paraugiem.

Hromatogrammā varat novērot un analizēt, kā tika veikta maisījuma sastāvdaļu atdalīšana. Tā optimālais pētījums ļauj identificēt vielu, pierādīt tās tīrību, kvantitatīvi noteikt maisījumā esošo vielu daudzumu, cita starpā.

Iegūtajai informācijai var būt kvalitatīvs raksturs; piemēram, kad tiek identificētas vielas un noteikta to tīrība. Kvantitatīvā informācija attiecas uz sastāvdaļu skaita noteikšanu maisījumā un atdalītās analizējamās vielas koncentrāciju.

Vielu identifikācija

Analizējot hromatogrammas rezultātus, dažādas vielas var identificēt, salīdzinot aiztures laikus ar zināmajām vielām. To var novērot, ja pētāmās vielas pārvietojas tādā pašā attālumā, ja tām ir vienāds laiks ar zināmajām vielām.

Piemēram, hromatogrammā var noteikt un identificēt tādu zāļu metabolītus kā stimulanti un steroīdi sportistu urīnā. Tas ir svarīgs atbalsts dažu metabolītu, kas rodas jaundzimušo ģenētisko traucējumu rezultātā, izpētē un izpētē.

Hromatogramma atvieglo halogēnu ogļūdeņražu noteikšanu dzeramajā ūdenī, starp citām vielām. Tas ir būtisks kvalitātes kontroles laboratorijas analīzē, jo tas ļauj atklāt un identificēt dažādu produktu piesārņotājus.

Vielu tīrības klasifikācija

Hromatogrammā var atšķirt tīras un piemaisītas vielas. Tīra viela hromatogrammā radītu vienu virsotni; tā kā netīra viela radītu divus vai vairākus pīķus.

Pareizi pielāgojot apstākļus, kādos veic hromatogrāfiju, divām vielām var novērst vienas pīķa veidošanos.

Vielu kvantitatīvā noteikšana

Analizējot hromatogrammas pīķa laukumu, var aprēķināt parauga sastāvdaļu koncentrāciju.

Tāpēc pīķa laukums ir proporcionāls paraugā esošās vielas daudzumam. Šie kvantitatīvie dati tiek iegūti īpaši jutīgās sistēmās, piemēram, tādās, kas iegūtas gāzu vai šķidrumu hromatogrāfijā.

Veidi

Viena no hromatogrammu klasifikācijām ir cieši saistīta ar dažādiem hromatogrāfijas veidiem, kas rada atbilstošo hromatogrammu.

Atkarībā no darbības apstākļiem detektoriem, cita starpā, hromatogrammas saturs un kvalitāte mainīsies.

Hromatogrammas uz papīra vai plānā kārtā

Hromatogrammu var ģenerēt tieši uz papīra vai plānas kārtas, tieši parādot parauga sastāvdaļu sadalījumu vai sadalījumu.

Tas ir ļoti noderīgi tādu krāsainu vielu atdalīšanai un izpētei, kurās ir dabiski pigmenti, piemēram, hlorofils. To var pakļaut attīstības procesiem, ja vielām nav dabiskas krāsas, un tā ir noderīga kvalitatīviem pētījumiem.

Hromatogrammas, ko rada detektori

Hromatogrammu var iegūt arī, izmantojot detektoru, kas reģistrē reakciju, izeju vai hromatogrāfijas signālu. Kā minēts iepriekš, šis detektors cita starpā parasti ir spektrofotometrs, masas spektrometrs, automātiskie sekvenci, elektroķīmiskās vielas.

Kolonnās ģenerētās hromatogrammās - gan gāzēs, gan šķidrumos, kā arī augstas izšķirtspējas plānās kārtās - izmanto detektorus.

Atkarībā no detektora veida hromatogrammu var klasificēt kā diferenciālo vai integrālo atkarībā no detektora reakcijas formas.

Diferenciālā hromatogramma

Diferenciālais detektors nepārtraukti mēra reakcijas signālu no hromatogrammas, savukārt integrālie detektori kumulatīvi mēra atbilstošo signālu.

Diferenciālā hromatogramma ir hromatogramma, ko iegūst ar diferenciāļa detektoru. Šie detektori ietver, piemēram, spektrofotometrus un detektorus elektriskās vadītspējas izmaiņām.

Šis hromatogrammas veids parāda anjonu atdalīšanas rezultātu no parauga, ko nosaka ar netiešu fotometriju. Tādi paši rezultāti ir iegūti arī jonu izpētē, piemēram, ar galīgo noteikšanu ar konduktimetriju.

Diferenciālā hromatogramma. Avots: Pixabay

Augšējā diagrammā parādīts diferenciālās hromatogrammas piemērs, kas iegūts ar automātiskiem DNS (dezoksiribonukleīnskābes) sekveneriem. Diagrammā skaidri parādītas četru krāsu virsotnes, viena krāsa katrai slāpekļa bāzei DNS.

Izmantojot datorizētu programmu, tiek atvieglota analizētās DNS bāzu secības interpretācija, kā arī sarežģītākām analītēm.

Integrālā hromatogramma

Integrālā hromatogramma atbilst hromatogrammai, ko iegūst ar integrālo detektoru. Šī hromatogramma parāda viena pētāmā komponenta izlaidi. Vairāki pīķi netiek iegūti kā diferenciācijā.

Integrētajā hromatogrammā tiek iegūts ieraksts ar formu, kas aprakstīta kā solis. Šī forma ir hromatogrammas daļa, kas atbilst vienas vielas daudzumam, kas iznāk no kolonnas.

Atsauces

1. Bhanots, D. (2013). Kā lasīt hromatogrammu? Atgūts no: lab-training.com
2. Kerija, FA (2006). Organiskās ķīmijas sestais izdevums. Mc Graw Hill izdevniecība
3. Hromatogrāfija šodien. (2014). Kas ir hromatogramma? Atgūts no: chromatographytoday.com
4. Mathias, J. (2018). Iesācēja ceļvedis: kā interpretēt gāzu hromatogrāfijas hromatogrāfijas masas spektrometrijas rezultātus. Atgūts no: innovatechlabs.com
5. Spānijas Hromatogrāfijas un saistīto paņēmienu biedrība. (2014). Hromatogramma. Atgūts no: secyta.es
6. Wikipedia. (2019. gads). Papīra hromatogrāfija. Atgūts no: wikipedia.org