BAKTERIOLOĢISKĀ CILPA: RAKSTUROJUMS, VEIDI, LIETOJUMI - BIOLOĢIJA - 2025

Bakterioloģisko cilpa ir darba instruments, ko mikrobiologiem izmanto sēšanai mikrobu kultūrām (baktērijas vai sēnītes). Iespējams, ka tas ir instruments, ko šie speciālisti visvairāk izmanto.

Tās lietošana šķiet vienkārša, taču patiesībā tā prasa daudz apmācības. Pirms sēšanas cilpa ir jāsterilizē Bunsena degli, pēc tam ņem mikrobu sējmateriālu, kas var rasties no šķidrās kultūras vai cietās kultūras.

Bakterioloģisko cilpu veidi. Avots: nav sniegts mašīnlasāms autors. ば や お pieņemts (pamatojoties uz autortiesību pretenzijām).

Pēc sējmateriāla ņemšanas to var nogulsnēt šķidrā barotnē vai iesēt cietā barotnē. Pēc katras procedūras cilpa tiek atkal sterilizēta. Rokturis ir piemērots arī mikrobu uztriepes izgatavošanai uz priekšmetstikliņa.

Bakterioloģiskajai cilpai ir daudz nosaukumu, tai skaitā: platīna cilpa vai cilpa, inokulācijas cilpa vai sēklas cilpa, tomēr tās īstais nosaukums ir Kohle cilpa.

Materiāls, ar kuru tiek izgatavots rokturis, parasti ir niķeļa-hroma (nihroma) sakausējums vai platīns. Vēl viena tirgū pieejama šķirne ir plastmasas vienreizējās lietošanas bakterioloģiskās cilpas.

No otras puses, ir vairāki bakterioloģisko cilpu veidi, katrs no tiem pilda funkciju mikrobiologa veikto uzdevumu ietvaros. Roktura izvēle būs atkarīga no tā, kas jādara.

Piemēram, lai veiktu striatum ar noārdīšanu, lai izolētu mikroorganismu, tiek izmantota platīna cilpa, kas beidzas ar slēgtu gredzenu, neatkarīgi no tā, vai tas ir kalibrēts vai nē.

Tā kā, ja ir jāsēj urīna paraugs, ja ir svarīgi kvantitatīvi noteikt CFU, ir jāizmanto kalibrētā cilpa. Tāpat, lai inokulētu bioķīmiskos testus, kurus nepieciešams sēt ar punkciju, adatas cilpa ir būtiska. Ir svarīgi, lai rokturi apstrādātu apmācīts personāls.

raksturojums

Bakterioloģiskās cilpas veido divas galējības. Viens gals atbilst rokturim vai pamatnei, bet otrs ir pats rokturis.

Roktura pamatne vai rokturis

Pamatne kalpo roktura satveršanai apstrādes laikā. Tas parasti ir metāla, bet tam ir siltuma izolators, kas novērš operatora sadedzināšanu, kad roktura galu sterilizē uz šķiltavas. Tas ir apmēram 20 cm, lai arī tas var būt garāks. Tam ir vītne, lai pielāgotu rokturi.

Rokturis

Tas ir funkcionāls gals, tas ir, tā ir tā daļa, kas nonāk saskarē ar mikroorganismiem un barotni. Tas sastāv no smalkas stieples, kas tiek ievietota pamatnē.

Rokturis var būt izgatavots no nihroma vai platīna, tāpēc to dažreiz sauc par platīna rokturi. Tas ir aptuveni 6,5 cm garš, un tā platums ir aptuveni 0,20 mm. Rokturis ar rokturi var būt 26,5 cm. Mērījumi dažādiem ražotājiem var atšķirties.

Veidi

Pastāv vairāki bakterioloģisko cilpu veidi, un katram no tiem ir noteikts lietojums. Rokturu veidi ir šādi: kalibrēts gredzenveida rokturis, nekalibrēts gredzenveida rokturis, taisns vai adatas rokturis, lāpstiņas rokturis, “L” formas rokturis un rokturis ar asu galu.

No otras puses, rokturi var būt pastāvīgi vai vienreiz lietojami. Pastāvīgai lietošanai paredzētās šķiltavas ir sterilizētas, tās ir atkārtoti lietojamas un ļoti izturīgas. Kaut arī vienreizējās lietošanas izstrādājumi ir sterili no rūpnīcas, tie tiek izmantoti tikai vienu reizi un tiek izmesti.

Lietojumprogrammas

Gredzena rokturis, nav kalibrēts

Tas ir mikrobioloģijas laboratorijā visvairāk izmantotais rokturis. To izmanto, lai paņemtu mikrobu suspensijas (šķidra barotne) vai kolonijas daļas (cietā barotne) sējumu, kas jāsēj citā barotnē - vai nu bioķīmiskajā testā, vai atkarībā no gadījuma bagātinātākā vai selektīvākajā barotnē. Tas ir noderīgi arī mikrobu uztriepes veidošanai uz priekšmetstikliņa.

Izmantojot šāda veida cilpas, sākotnējo inokulātu var nosvītrot. Tas ir konstruēts arī tā, lai tas vienmērīgi slīdētu uz agara, to nesabojājot. Protams, tas prasa apmācītu personālu, kas apstrādā sēšanas tehniku, pieliekot pareizu spēku un kustības, lai izdarītu labu stīgu.

Ar šo rokturi var veikt dažādas sēšanas tehnikas. Piemēram, cietās barības vielas Petri trauciņos parasti tiek izsētas (izsmidzināšanas metodes ir vairākas, sk. 1. video).

Šis paņēmiens ir paredzēts izolētu koloniju iegūšanai, lai tās izpētītu un identificētu, it īpaši, ja paraugs ir polimikrobiāls, tas ir, kultūra nav tīra (tajā ir vairāk nekā viens mikroorganismu tips).

Tā vietā ķīļi tiek stādīti vienkāršā zigzagā, lai iegūtu baktēriju masu, kas šajā gadījumā nav nepieciešams koloniju izolēšanai.

Dažreiz tos izmanto arī noteiktu paraugu ņemšanai. Piemēram, Rojas et al., Lai savāktu no žurkām nokasītos maksts audu paraugus, izmantoja bakterioloģisko cilpu.

Bakterioloģiskā cilpa ar gredzena galu, nav kalibrēta. Avots: Pixinio.com

Gredzenveida rokturis, kalibrēts

Šis rokturis, kā to norāda nosaukums, ir kalibrēts, lai ņemtu noteiktu daudzumu mikrobu suspensijas. To izmanto, ja sējai ir nepieciešams ievērot to, kas standartizēts šajā jomā.

Piemēram, urīna kultūru stādīšana ir ļoti izplatīta. Šajā gadījumā var izmantot 0,01 ml un 0,001 ml kalibrētu cilpu.

Jāatzīmē, ka kalibrētajiem rokturiem ir kļūdas robeža, kas mainās atkarībā no parauga ņemšanas leņķa un tvertnes mutes lieluma.

Ja 0,001 ml cilpa tiek vertikāli ievietota traukā ar mazu muti (≤ 7 mm), ņemtais daudzums būs par 50% mazāks, nekā paredzēts.

Tas notiek tāpēc, ka jo mazāks ir tvertnes mutes diametrs, jo lielāks ir virsmas spraigums un līdz ar to palielinās saķeres spēki starp (stikls - šķidrums). Tas samazina roktura uzņemtā šķidruma daudzumu.

Tā kā, ja to ņem 45 ° leņķī konteinerā ar platu muti (≥ 22 mm), tas var savākt par 150% vairāk nekā nepieciešamais daudzums. Šajā gadījumā virsmas spraigums ir mazāks un stikla / plastmasas kohēzijas spēki samazinās, bet šķidruma-šķidruma kohēzijas spēks palielinās.

Iepriekšminētā dēļ urīna kultūrām dažreiz tiek dota priekšroka citām koloniju veidojošo vienību kvantitatīvās noteikšanas metodēm.

Taisns vai adatas rokturis

To sauc arī par diegu rokturi. To izmanto, lai inokulētu noteiktus bioķīmiskos testus, īpaši tos, kas jāiesēj ar punkcijas paņēmienu. Piemērs pusšķidrā vidē, kas sagatavota bloka formā, piemēram: SIM, MIO un O / F barotne.

Turklāt MIO un SIM gadījumā, kas novērtē kustīgumu, ir svarīgi, lai punkciju veiktu ar adatas cilpu, jo pozitīvas kustības interpretācija notiek, kad baktērijas aug sākotnējā sējmašīnas sānos.

Ar cilpas cilpu inokulēts tests var viltot rezultātus (kļūdaini pozitīvi). Šī iemesla dēļ šāda veida sēklām ir jārūpējas, lai punkcija būtu unikāla, un, kad to noņem, tā iznāk tajā pašā virzienā, kurā ievadīja.

Vēl viens pārbaudījums, kas jāveic ar adatām, pat ja tas ir sagatavots ķīļa formā, ir Kliglers. Šajā testā nav ieteicams, lai skābeklis dziļi iekļūtu agarā, jo dažu ķīmisku reakciju norisei nepieciešama barotne, kurā trūkst skābekļa. Šis rokturis tiek izmantots arī, lai pieskartos noteiktai kolonijai subkultūras vajadzībām.

Lāpstiņas rokturis

Lielākā daļa mikroorganismu dod mīkstas, viegli sabojājamas kolonijas. Tomēr ir daži mikrobi, kuru kolonijas ir cietas un sausas, piemēram, mikobaktērijas kopumā un dažas sēnītes. Šajos gadījumos ir lietderīgi izmantot lāpstiņas rokturi.

"L" formas rokturis

To visbiežāk izmanto sēnīšu kultūru, īpaši pelējuma, pievilināšanai.

Asas galiņa rokturis

Tas ir noderīgi, lai ņemtu ļoti mazas kolonijas, kas atrodas polimikrobu kultūrās, lai varētu subkultūru.

Sēšanas paņēmieni

1. video

Platīna roktura sterilizācija

Rokturis jāsterilizē pirms un pēc lietošanas. Lai sterilizētu bakterioloģisko cilpu šķiltavī, rīkojieties šādi: rokturis jānovieto liesmas augšējā daļā, pēc iespējas vertikālā stāvoklī, tādā veidā, lai sterilizētu no gala uz augšu.

Kad smalkais pavediens kļūst spilgti sarkans, var teikt, ka tas ir sterils. Lai to izmantotu, tas tiek atdzesēts un tiek ņemts izvēlētais paraugs. (Skat. 2. video).

Bakterioloģiskās cilpas sterilizācija

2. video

Atsauces

1. "Bakterioloģiskā cilpa" Wikipedia, Bezmaksas enciklopēdija. 2019. gada 23. jūlijs, 13:31 UTC. 2019. gada 18. augusts, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrēti metāla rokturi mikrobiologiem: alternatīva valsts ražošanai. Soc., Nāc. Mikrobiols. 2010; 30 (1): 37-42. Pieejams vietnē: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Beilija un Skota mikrobioloģiskā diagnostika. 12 ed. Redakcija Panamericana SA Argentīna.
4. Konemans E, Allens S, Janda V, Šrekenbergers P, Vins V. (2004). Mikrobioloģiskā diagnostika. 5. ed. Redakcija Panamericana SA Argentīna.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Eupatorium arsenei ziedu heksāna ekstrakta pretsāpju efekta noteikšana akūtu sāpju modelī žurkām. mex. zinātne. ferma. 2015; 46 (1): 64–69. Pieejams vietnē: scielo.org