- raksturojums
- Sagatavošana
- Lietojumprogrammas
- Sārmainās fosfatāzes noteikšana
- Prostatas antigēna (PSA) noteikšana
- Enzīma arginīna kināzes vai fosfokināzes aktivitātes noteikšana
- Toksicitāte
- Cilvēkā
- Ietekme uz vidi
- Atsauces
Thymolphthalein ir pH indikators ar to zinātnisko nosaukumu: 3,3-bis -isobenzofuranone -1 (3H), un tā ķīmiskā formula ir C 28 H 30 O 4 . Tas tiek sintezēts no ftalilskābes anhidrīda un timola.
Šim pH indikatoram ir ļoti savdabīgas īpašības, jo pie ārkārtīgi zema pH tas ir intensīvi sarkans (pH <0). Pēc tam ir plašs pH diapazons, kurā tas ir pilnīgi bezkrāsains (pH 1 - 9,2), ar pagrieziena diapazonu no 9,3 līdz 10,5, kur tas var mainīties uz zilu, savukārt virs 10,5 tas ir zils intensīva.
Timolftaleīna ķīmiskā struktūra skābā pH (bezkrāsains) un sārmainā pH (dziļi zils). Avots: Dannybalanta /Pxhere.com
Tās pielietojums ietver kalpošanu kā skābes bāzes indikatoru noteiktos ķīmiskajās reakcijās. To izmanto arī kā hromogēnu dažās kolorimetriskās reakcijās, kur tiek novērtēta fermentatīvā aktivitāte. Piemēram, sārmainās fosfatāzes noteikšanā.
Attiecībā uz toksicitāti tas ir mazāk kaitīgs nekā citi pH rādītāji, un tos Nacionālā ugunsdrošības asociācija (NFPA) klasificē kā 1. līmeni attiecībā uz tā iedarbību uz veselību; kas nozīmē, ka tas nav kancerogēns vai mutagēns.
Tam nav arī specifiskas toksicitātes pret kādu mērķorgānu; tas ir, tas rada nelielu agresijas risku veselībai. Tomēr tiešs kontakts ar ādu un gļotādu var izraisīt nelielu kairinājumu.
No otras puses, uzliesmojamības ziņā to klasificē kā 1 un reaģētspējas ziņā kā nulli.
raksturojums
PH indikatora timolftaleīns cietā formā ir balts pulveris, šķidrā stāvoklī tas ir intensīvi sarkans, ja pH ir zemāks par nulli, bezkrāsains pie pH 1-9,2 un zils virs 10,5. Tā molārā masa ir 430,54 g / mol, ar kušanas temperatūru (258 ° C), bet viršanas temperatūra svārstās no 248-252 ° C. Blīvums 25 ° C temperatūrā ir 0,92 g / ml
Tas nešķīst aukstā ūdenī un nešķīst etanolā. Tā nav sprādzienbīstama viela.
Piesardzības nolūkos pārvadāšanas laikā, glabājot un apstrādājot, jātur prom no spēcīgiem oksidētājiem.
Sagatavošana
Tilpuma analīzē parasti izmanto pH indikatora timolftaleīnu 0,1% koncentrācijā. Lai to izdarītu, rīkojieties šādi:
- Nosver 100 mg timolftaleīna un izšķīdina 100 ml 95% etilspirta.
To var sagatavot arī šādi:
- Nosver 100 mg timolftaleīna, izšķīdina 60 ml absolūtā spirta un pievieno 40 ml destilēta ūdens.
- Uzglabāt istabas temperatūrā (15–25 ° C). Ir svarīgi, lai uzglabāšanas vieta būtu vēsa, vēdināta un bez mitruma.
Lietojumprogrammas
Sārmainās fosfatāzes noteikšana
Nosakot šo testu, ir tehnika, kuras pamatā ir sārmainās fosfatāzes hidrolītiskā iedarbība uz timolftaleīna monofosfātu. Ja ir sārmainā fosfatāze, tā hidrolizēs timolftaleīna monofosfātu, atbrīvojot timolthaleīnu.
Tādējādi sārmainā pH iegūst zilu nokrāsu. Sārmainās fosfatāzes fermentatīvā aktivitāte ir tieši proporcionāla izveidotās krāsas intensitātei. Absorbciju nolasa pie 590 nm.
Prostatas antigēna (PSA) noteikšana
Šajā ziņā Shao F un līdzstrādnieki 2018. gadā izstrādāja kolorimetrisko paņēmienu, kurā viņi izmanto mezopora silīcija dioksīda nanodaļiņas, kas ieslodzīja timolftaleīna molekulas, kuras cieši saista feniltrimetiloksisilana klātbūtne.
Šīs nanodaļiņas savukārt ir pārklātas ar polietilēnimīnu (PEI), sekmējot sekundāro anti-PSA antivielu saistīšanos.
No otras puses, pacienta paraugs ir imobilizēts uz plāksnes; un kad esošais PSA ir saskarē ar nanodaļiņām, tas saistās ar antivielām. Nanodaļiņas, kas nesaistās, tiks noņemtas.
Pēc tam timoltoftaleīns tiks viegli atbrīvots, pievienojot sārmainu šķīdumu, kas iegūst zilu nokrāsu. Krāsas pakāpe ir tieši proporcionāla PSA koncentrācijai.
Enzīma arginīna kināzes vai fosfokināzes aktivitātes noteikšana
Izmantojot pH indikatora timolftaleīnu, var noteikt arginīna kināzes fermentatīvo aktivitāti. Pārbaudes pamatā ir:
Fermenta arginīna kināze ir fosfotransferāze, kas piedalās fosfoarginīna veidošanā, kā atklājās šādā ķīmiskajā reakcijā:
Avots: "Arginīna kināze." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 10. jūlijs, 13:49 UTC. 2019. gada 20. maijs, 03:58 wikipedia.org/
Ja šo reakciju veic pret pH indikatora timolftaleīnu, ir iespējams izmērīt fermenta aktivitāti. Tas ir iespējams saskaņā ar šādu skaidrojumu: reakcija notiek ar sārmainu pH, kur timolftaleīns parādīs savu zilo krāsu.
Fermentatīvo aktivitāti mēra ar krāsas izbalēšanu, ko atspoguļo absorbcijas samazināšanās pie 575 nm, jo, fermentam darbojoties, izdalās protoni (H +), kas paskābina barotni.
Tas izraisa timolftaleīna krāsas zaudēšanu, kad tas tuvojas pagrieziena zonai. Ja pH līmenis pazeminās zem 9,2, tas kļūst pilnīgi bezkrāsains.
Tāpēc zilās krāsas intensitāte ir apgriezti proporcionāla fermenta aktivitātei.
Toksicitāte
Cilvēkā
Šis savienojums ir mazāk toksisks nekā vairums pH indikatoru, jo līdz šim tam nav piedēvēta nekāda kancerogēna vai mutagēna iedarbība. Tomēr tas nav pilnīgi nekaitīgs: nonākot saskarē ar ādu un gļotādām, tas var izraisīt apsārtumu minētajās vietās.
Nejaušas norīšanas vai ieelpošanas gadījumā tas var izraisīt arī nevēlamas reakcijas.
Tieša kontakta ar ādu un gļotādām gadījumā skarto zonu vismaz 15 minūtes jāmazgā ar lielu daudzumu ūdens. Un, ja viņi novēro kairinājuma pazīmes, viņiem jādodas uz tuvāko veselības aprūpes centru.
Tāpēc apstrādes laikā ieteicams izmantot tādus drošības līdzekļus kā halāts, cimdus un aizsargbrilles.
Neskatoties uz zemu uzliesmojamības risku, ieteicams piesardzības nolūkos uzturēties prom no šķiltavām.
Ietekme uz vidi
Neskatoties uz to, ka tas ir mazāk toksisks cilvēku veselībai, tas ir toksisks ūdens vidē, ietekmējot tajā sastopamos organismus. Turklāt tam ir liela bioakumulācijas spēja, un ilgtermiņā ir iespējams, ka var veidoties videi kaitīgi noārdīšanās produkti.
Tāpēc jāizvairās no šī produkta nonākšanas virszemes vai pazemes ūdeņos, jo tas varētu ietekmēt dzeramo ūdeni.
Šajā ziņā laboratorijām, kuras izmanto šo indikatoru, atkritumi jālikvidē saskaņā ar katrā valstī spēkā esošajiem noteikumiem.
Atsauces
- Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Fitālā fosfora pieaugošo koncentrāciju ietekme uz fitāzes un sārmainās fosfatāzes enzīmu aktivitāti jauno aitu zarnu epitēlijā. Cien. (Marakaibo). 2008.18 (1): 59–64. Pieejams vietnē: scielo.org.
- "Timolftaleīns." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2019. gada 22. februāris, 04:40 UTC. 2019. gada 19. maijs, 22:20, es.wikipedia.org.
- Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Prostatas specifiskā antigēna bez enzīmu imunosorbcijas tests, kas tiek pastiprināts, atbrīvojot pH indikatora molekulas, kas iesprostotas mezoporārā silīcija nanodaļiņās. Anal Chem., 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
- Yu Z, Pan J, Zhou HM. Tieša nepārtraukta pH-spektrofotometriskā pārbaude arginīna kināzes aktivitātei. Olbaltumviela Pept Lett. 2002. gads; 9 (6): 545-52.
- Šarlau. Timolftaleīna drošības datu lapa. 2013.Pieejams vietnē: javeriana.edu.co
- Timolftaleīna drošības datu lapa. MSDS. Heredijas Nacionālā universitāte, Kostarika. Pieejams: timolftaleīns% 20 (3).
- "Arginīna kināze." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 10. jūlijs, 13:49 UTC. 2019. gada 20. maijs, 03:58 lv.wikipedia.org.