- Vēsture
- Kam paredzēts Benedikta reaģents?
- Glikozes noteikšana urīnā
- Šķīduma krāsošana
- Dažādu monosaharīdu un disaharīdu noteikšana
- Komponenti
- Lietošanas procedūra
- Benedikta testa reakcija
- Benedikta reaģenta sagatavošana
- Atsauces
The Benedikta 'S reaģents ir zils vara šķīdums, kas tiek izmantots, lai atklātu reducējošo cukuru: aldehīdi, alfa-hidroksi ketoniem un hemiketals. To izstrādāja Stenlijs R. Benedikts (1884–1936).
Alfa-hidroksi-ketona cukuriem ir raksturīga tā, ka ketona tuvumā atrodas hidroksilgrupa. Tikmēr hemiketāls ir savienojums, kas rodas, pievienojot spirtu aldehīdam vai ketonam. Benedikta reaģents bez izvēles reaģē uz visiem šiem reducējošajiem cukuriem.
Mēģinājumu krāsas pēc Benedikta reaģenta pievienošanas ļauj mums puskvantitatīvi uzzināt, cik daudz reducējošo cukuru ir izšķīduši. Avots: Thebiologyprimer
Benedikta metode balstās uz cukuru reducējošo iedarbību uz Cu 2+ , kas ir zilā krāsā, kas to pārveido Cu + . Cu + veido ķieģeļsarkanas vara oksīda nogulsnes. Tomēr atkarībā no cukuru koncentrācijas parādās krāsu spektrs (augšējais attēls).
Ņemiet vērā: ja Benedikta reaģents tiek pievienots mēģenē, nesamazinot cukurus (0%), tā zilganā krāsa nemainās. Tādējādi, kad koncentrācija ir augstāka par 4%, mēģeni iekrāso brūnā krāsā.
Vēsture
Reaģentu izveidoja amerikāņu ķīmiķis Stenlijs Rossiters Benedikts 1909. gadā, kurš žurnālā J. Biol. Chem publicēja savu zinātnisko rakstu A reaģents reducējošo cukuru noteikšanai.
Turklāt Lūiss un Benedikts (1915) publicēja metodi reducējošo cukuru noteikšanai asinīs, izmantojot indikatoru pikrātu; bet tas tika pārtraukts specifiskuma trūkuma dēļ.
Benedikta reaģents ir ļoti līdzīgs Fehlinga reaģentam. Tās atšķiras ar to, ka Benedikts izmanto citrāta jonu un nātrija karbonāta sāli; savukārt Fehlings izmanto tartrāta jonu un nātrija hidroksīdu.
Benedikta tests ir kvalitatīvs, tas ir, tas nosaka tikai reducējošo cukuru klātbūtni. Tomēr Benedikta reaģents var būt kvantitatīvs, ja tā šķīdumā ir kālija tiocianāts, kas veido baltas vara tiocianāta nogulsnes, kuras var titrēt, izmantojot glikozes standartus.
Kam paredzēts Benedikta reaģents?
Glikozes noteikšana urīnā
Benedikta reaģents joprojām tiek izmantots, lai noteiktu glikozes klātbūtni urīnā, un tas ir norāde uz diabēta slimību pacientam, kura urīns tiek pakļauts Benedikta testam. Lai gan nevar izslēgt, ka glikozūrijai ir atšķirīga izcelsme.
Piemēram, paaugstināta glikozūrija tiek konstatēta tādos apstākļos kā grūtniecība, primārā nieru glikozūrija, nieru tubulārā acidoze, primārais vai sekundārais Fankoni sindroms, hiperaldosteronisms un akūts pankreatīts vai aizkuņģa dziedzera vēzis.
Benedikta reaģents ir zilā krāsā Cu 2+ klātbūtnes dēļ , kas reducējošo cukuru ietekmē tiek samazināts līdz Cu + ; šajā gadījumā glikoze, veidojot ķieģeļu sarkanā vara (I) oksīda nogulsnes.
Šķīduma krāsošana
Benedikta testā urīnam nogulšņu krāsa un veidošanās mainās atkarībā no reducējošā cukura koncentrācijas. Ja glikozes koncentrācija urīnā ir mazāka par 500 mg / dL, šķīdums kļūst zaļš, un nogulsnes neveidojas.
Glikozes koncentrācija urīnā 500–1000 mg / dL izraisa zaļas nogulsnes Benedikta testā. Koncentrācijā, kas pārsniedz 1000 līdz 1500 mg / dL, tas izraisa dzeltenu nogulsņu veidošanos.
Ja glikozes koncentrācija ir 1500–2000 mg / dL, būs redzamas oranžas nogulsnes. Visbeidzot, glikozes koncentrācija urīnā ir lielāka par 2000 mg / dL, un tas izraisīs ķieģeļsarkanas nogulsnes.
Tas norāda, ka Benedikta testam ir daļēji kvantitatīvs raksturs un rezultātu paziņo, izmantojot krustiņus. Tā, piemēram, zaļo nogulsņu veidošanās atbilst krustam (+); un ķieģeļsarkanu nogulsņu veidošanās atbilst četriem krustiem (++++).
Dažādu monosaharīdu un disaharīdu noteikšana
Benedikta reaģents nosaka reducējošo cukuru klātbūtni, kuriem kā molekulārajai struktūrai ir brīva funkcionālā grupa vai brīva ketonu funkcionālā grupa. Tas attiecas uz glikozi, galaktozi, mannozi un fruktozi (monosaharīdi), kā arī laktozi un maltozi (disaharīdi).
Saharoze un ciete nereaģē ar Benedikta reaģentu, jo tajās ir brīvas reducējošās grupas. Turklāt ir savienojumi, kas traucē Benedikta testu urīnā, dodot nepatiesu pozitivitāti; tāds ir salicilāta, penicilīna, streptomicīna, levodopas, nalidiksīnskābes un izoniazīda gadījums.
Urīnā ir ķīmiskas vielas, kas var mazināt Benedikta reakciju; piemēram: kreatinīns, urāts un askorbīnskābe.
Komponenti
Benedikta reaģenta sastāvdaļas ir šādas: vara sulfāta pentahidrāts, nātrija karbonāts, trinātrija citrāts un destilēts ūdens.
Vara sulfāta pentahidrāts, CuSO 4 · 5H 2 O, satur Cu 2+ : tas ir savienojums, kas Benedikta reaģentam piešķir tā zilo krāsu. Reducējošie cukuri iedarbojas uz Cu 2+ , izraisot tā reducēšanu līdz Cu + un veidojot vara oksīda (Cu 2 O) ķieģeļsarkanas nogulsnes .
Nātrija karbonāts rada sārmainu vidi, kas nepieciešama vara reducēšanai. Nātrija karbonāts reaģē ar ūdeni, veidojot nātrija bikarbonātu un hidroksiljonu, OH - , kas ir atbildīgs par barotnes sārmainību, kas nepieciešama reduktīvā procesa norisei.
Nātrija citrāts veido kompleksu ar varu (II), kas uzglabāšanas laikā neļauj tam samazināties līdz Cu (I).
Lietošanas procedūra
20 x 160 mm mēģenē ievieto 5 ml Benedikta reaģenta un pievieno 8 pilienus urīna. Testa mēģeni viegli sakrata un 5-10 minūtes ievieto verdoša ūdens traukā.
Pēc šī laika mēģeni noņem no karstā ūdens vannas un tās virsmu atdzesē ar tekošu ūdeni, lai beidzot iegūtu nolasījumu par rezultātu, kas iegūts, veicot Benedikta testu (krāsas).
Benedikta testa reakcija
Cu (II) samazinājumu Benedikta testa laikā var shematizēt šādi:
RCHO + 2 Cu 2+ (kompleksā) + 5 OH - => RCOO - + Cu 2 O + 3 H 2 O
RCHO = aldehīds; RCOO - = (karboksilāta jons); Cu 2 O = vara oksīds, ķieģeļsarkanas nogulsnes.
Benedikta reaģenta sagatavošana
Nosver 173 gramus nātrija citrāta un 100 gramus nātrija karbonāta un kopā izšķīdina 800 ml silta destilēta ūdens. Ja tiek novērotas neizšķīdušu vielu pēdas, šķīdums jāfiltrē.
No otras puses, 17,3 gramus vara sulfāta pentahidrāta tiek izšķīdināti 100 ml destilēta ūdens.
Pēc tam divus ūdens šķīdumus viegli sajauc un turpina nepārtrauktu maisīšanu, papildinot ar destilētu ūdeni līdz 1000 ml.
Atsauces
- Grehems Solomons TW, Kreigs B. Frīls. (2011). Organiskā ķīmija. Amīni. (10 th izdevums.). Wiley Plus.
- Klarks J. (2015). Aldehīdu un ketonu oksidēšana. Atgūts no: chemguide.co.uk
- Wikipedia. (2020). Benedikta reaģents. Atgūts no: en.wikipedia.org
- Redakcijas komanda. (2019. gada 9. janvāris). Benedikta pārbaude: princips, reaģenta sagatavošana, procedūra un interpretācija. Atgūts no: laboratorijainfo.com
- Dr Whitson. (sf). Benedikta reaģents: cukuru samazināšanas tests. Atgūts no: nku.edu