- Krāsvielas, ko izmanto vienkāršā krāsošanā
- 6 soļi līdz vienkāršai krāsošanai
- 1. solis
- Novērošana
- 2. solis
- Novērošana
- 3. solis
- 4. solis
- Novērošana
- 5. solis
- Atsauces
Viena krāsojumam ir iekrāsotas procedūra ātri un vienkārši, kurā viena krāsu tiek izmantota, tāpēc tā tiek saukta vienkārši. To galvenokārt izmanto, lai noteiktu paraugā esošo šūnu morfoloģiju un organizāciju.
Šūnas ir dabiski bezkrāsainas, tāpēc ir nepieciešams tās kaut kādā veidā padarīt redzamas, skatoties mikroskopā.
Cilvēka vaigu šūnas iekrāso ar vienkāršu metilēnzilo krāsošanu.
Svarīgi atzīmēt, ka krāsošanā izmantotajām krāsvielām jābūt pamatvielām ar pozitīvu lādiņu (katjonu), lai tās varētu spontāni saistīties ar šūnas sienu un citoplazmu.
Šīs šūnu struktūras ir negatīvi lādētas. Tas ir iemesls, kāpēc pozitīvi lādēta krāsa tiek piesaistīta šūnām un spontāni saistās ar tām. Tādējādi visas šūnas paraugā tiek ātri iekrāsotas.
Krāsvielas, ko izmanto vienkāršā krāsošanā
Ir vairāki pamata traipi, kurus var izmantot mikrobioloģijas laboratorijā. Visbiežāk tiek izmantoti:
- metilēnzilā.
- Kristālviolets.
- malahīta zaļa.
- Pamata fuksīns.
Visas šīs krāsvielas labi darbojas baktērijās, jo tām ir pozitīvi lādēti (katjonu) krāsu joni (hromofori).
Krāsošanas laiks lielākajai daļai šo traipu ir samērā īss. Parasti tās ilgst no 30 sekundēm līdz 2 minūtēm, atkarībā no krāsas afinitātes.
Svarīgi atcerēties, ka pirms parauga iekrāsošanas ar vienkāršu iekrāsošanu tas jāpagarina un jāpiestiprina pie stikla priekšmetstikla (slaida); pagarinātu un fiksētu paraugu sauc par uztriepi.
6 soļi līdz vienkāršai krāsošanai
1. solis
Novietojiet slaidu uz krāsošanas statīva un uzklājiet vēlamo traipu. Ļaujiet attiecīgajam laikam rīkoties.
Parasti vienkārša krāsošana ilgst no dažām sekundēm līdz pāris minūtēm, atkarībā no izmantotā traipa.
Novērošana
Šajā posmā ir svarīgi nepārsniegt izmantotās krāsas ieteicamo laiku, jo uz lapas var veidoties kristāli, veidojot tā sauktos “artefaktus”, kas izkropļo šūnu morfoloģiju.
2. solis
Rūpīgi mazgājiet priekšmetstikliņa uztriepi ar destilētu ūdeni no pudeles vai arī ar lēnām tekošu krāna ūdeni, līdz notece kļūst dzidra. Parasti tas prasa 5-10 sekundes.
Novērošana
Nelietojiet ūdens plūsmu tieši uz uztriepes, lai izvairītos no tā, ka tā paša spēka dēļ tiek sabojāts paraugs.
Ja jums nav destilēta ūdens, varat bez problēmām izmantot krāna ūdeni, jo tas neietekmēs krāsošanas rezultātu.
3. solis
Noslaukiet priekšmetstikliņu ar absorbējošiem papīra dvieļiem vienā virzienā un bez berzes. Pārliecinieties, ka priekšmetstikla apakšdaļa ir tīra.
4. solis
Novērojiet iekrāsoto uztriepi zem mikroskopa. Sāciet ar visattālākajiem mērķiem, lai pareizi atrastu zonu, kuru vēlaties novērot sīkāk. Mainiet mērķi, lai tuvinātu un tuvinātu izlasei.
Novērošana
Objekta lietošanai ar lielāku palielinājumu (parasti 100X) ir jāizmanto iegremdēšanas eļļa, jo tas palīdz gaismai labāk iekļūt un attēls izskatās asāks. Nav nepieciešams izmantot pārsegu.
5. solis
Visbeidzot, visus paraugus izmetiet piemērotā tvertnē, kurai ir atbilstošs marķējums "bioloģiski bīstams".
Atsauces
- (2001). Mikrobioloģiskās Pielietojums: Laboratory Manual in General Mikrobioloģijas (8 th ed.). McGraw-Hill uzņēmumi.
- Harisha, S. (2006). Ievads praktiskajā biotehnoloģiju (1 st ). Ugunsmūra nesēji.
- Moyes, RB, Reynolds, J., un Breakwell, DP (2009). Iepriekšēja baktēriju iekrāsošana: Vienkārši traipi. Pašreizējie mikrobioloģijas protokoli (15. PAPILDINĀJUMS), 1. – 5.
- Pommervilla, J. (2013). Alcamo s pamati mikrobioloģijas laboratorijā (10 th ). Džounsa un Bartleta mācīšanās.
- Preskots, H. (2002). Laboratorijas vingrinājumi mikrobioloģijā (5. kurss ). McGraw-Hill uzņēmumi.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Mikrobioloģijas principi (1. st. ). Tata McGraw-Hill izglītība.