STIKLA VIDE: PAMATS, SAGATAVOŠANA UN PIELIETOJUMS - BIOLOĢIJA - 2025

Vide Stuart ir bieza masa agara vai buljonu bez barības vielām, ko izmanto, lai pārvadātu bioloģisko paraugu. Tās mērķis ir saglabāt paraugā esošos celmus dzīvotspējīgu noteiktu laiku, bet nepalielinot mikrobu populāciju.

To izveidoja Moffet, Young un Stuart 1948. gadā, un vēlāk tos pārveidoja Toshach un Patsula. Tas sastāv no nātrija glicerofosfāta, nātrija tioglikolāta, kalcija hlorīda un agara agara. Pēdējais ir daļēji cietā vidē un šķidrumā nav. Dažas laboratorijas tam pievieno metilēnzilo.

Culturette ar Stuart pārvadāšanu. Avots: Autors: CDC / Dr. Gilda Jones, Pieklājība: Sabiedrības veselības attēlu bibliotēka

Parasti tos izmanto, ja paraugu nav iespējams tūlīt sēt. Šajā gadījumā paraugu ievieto transportēšanas barotnē, kamēr to pārvieto uz laboratoriju, kas apstrādā kultūru.

Tādā veidā tiek garantēts, ka klātesošie mikroorganismi paliek dzīvi, līdz tie tiek inokulēti attiecīgajā barotnē.

Sākotnēji tā lietošana bija paredzēta urīnizvadkanāla vai maksts paraugu pārvadāšanai, ja bija aizdomas par Neisseria gonorrhoeae klātbūtni. Vēlāk viņi saprata, ka tā lietderība varētu būt plašāka.

Stjuarta barotne, cita starpā, izrādījās ļoti efektīva tādu labilu un izsmalcinātu mikroorganismu kā Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis saglabāšanā. Papildus citiem nekaitinošiem mikroorganismiem, piemēram, Enterobaktērijām.

Stjuarta barotne būtībā novērš parauga žāvēšanu, uztur osmozes līdzsvaru un saglabā mikroorganismus pie ideāla pH līmeņa. No otras puses, stratēģiski šī barotne nesatur barības vielas, tādējādi novēršot mikroorganismu pavairošanu.

Tirgū ir īpašas paraugu pārvadāšanas ierīces, kas satur šo vai citu transporta veidu, ko sauc par culturette. Tos var pagatavot arī laboratorijā.

Pamats

Stjuarta transporta veida mērķis ir saglabāt paraugus pēc iespējas tuvāk to sākotnējam stāvoklim, līdz tie tiek apstrādāti.

Nātrija glicerofosfāts un kalcija hlorīds ir buferšķīduma sistēma, kas darbojas, uzturot pH un osmolaritāti.

Tikmēr nātrija tioglikolāts darbojas kā reducējošs līdzeklis, un, ja tas satur agaru, tas piešķir pusšķidru konsistenci, lai aizkavētu barotnes skābekļa pievadīšanu. Visbeidzot, metilēnzilā ir oksidācijas indikators, tas ir, tas nosaka skābekļa klātbūtni.

Puscietā barotne ar redoksa indikatoru ir ideāli piemērota paraugu pārvadāšanai gadījumos, kad ir aizdomas par anaerobām baktērijām.

Transportlīdzekļa raksturojums

Stjuarts, tāpat kā visi transporta līdzekļi, atbilst noteiktām īpašībām, tai skaitā:

-Uztur esošos dzīvotspējīgos mikrobu celmus, tos nepareizinot.

-Nesatur barības vielas; Tā savienojumi ir paredzēti, lai paraugs būtu hidratēts pietiekamā pH un osmolaritātes apstākļos.

-Nomāc dažu delikātu mikroorganismu, piemēram, pneimokoku, autolizāciju.

-Izmantošana ir īslaicīga, to nevajadzētu pārāk ilgi pagarināt.

Sagatavošana

Daļēji cieta Stjuarta vide ar redoksa indikatoru

Mājas sagatavošana

Sastāvdaļas

Nātrija glicerofosfāts 10 gr

Nātrija tioglikolāts 1,0 gr

Kalcija hlorīds 0,1 gr

Metilēnzilā 0,002 gr

Agara agars 3 gr

Destilēts ūdens 1 L

Sajauciet sastāvdaļas un sildiet, līdz tā ir pilnībā izšķīdusi. Ielejiet mēģenēs vai īpašos tamponos. Tos ievada autoklāvā un 15 minūtes sterilizē 121ºC temperatūrā. Ļaujiet caurulēm atdzist vertikālā stāvoklī (bloka formā). Uzglabāt istabas temperatūrā.

Pagatavošana ar komerciālu barotni

Nosver 14,1 g barotnes 1 litrā destilēta ūdens. Bieži karsē, līdz tā pilnībā izšķīst, to var vārīt. Pārējā procedūra, kā jau aprakstīts.

Dehidrētā barotne ir krēmkrāsā, un sagatavotajai virsmai jābūt zilai. Tas ir saistīts ar metilēnzilā klātbūtni.

Barotnes pH jākoriģē līdz 7,4 ± 0,2

Liquid Modified Stuart Medium (mājās gatavots)

Sastāvdaļas

Nātrija glicerofosfāts 10 gr

Nātrija tioglikolāts 1 gr

Kalcija hlorīda dihidrāts 0,1 gr

Destilēts ūdens 1000 ml

Tam ir tās pašas sastāvdaļas kā daļēji cietajam, bet tajā nav agara vai metilēnzilā. Šajā gadījumā komponentus sajauc bez sildīšanas un 0,5 ml izdala 16 x 125 mm mēģenēs ar skrūvējamiem vāciņiem.

To sterilizē autoklāvā 121 ° C temperatūrā 10 minūtes. Paraugu ņemšanai jāizmanto dakrona tamponi, ja paraugs paredzēts PCR vai viskozes, ja tas paredzēts kultūrai.

Caurules uzglabā istabas temperatūrā.

Lietojumprogrammas

Komerciāli ir īpašas paraugu pārvadāšanas ierīces, ko sauc par culturette; Šī ierīce ir iegarena, plāna caurule, kuras iekšpusē ir tampons, un beigās ir segments, kas satur pusšķidru vai šķidru Stjuarta barotni.

Ierīce tiek atvērta, un paraugs tiek ņemts ar tamponu. Pēc tam to ievada atpakaļ mēģenē, līdz tampona galu ievieto puscietajā transporta vidē; Daži atved poliuretāna sūkli, kas piesūcināts ar šķidru Stjuarta barotni, ar kuru paraugu saglabā, to noturot mitru.

Ja ir aizdomas par delikātu mikroorganismu klātbūtni, parauga savākšanai jāizmanto kokvilnas tamponi ar kokogli.

Paraugi, ko var ņemt ar tamponiem vai tamponiem un pārnest šajā barotnē, ir rīkles eksudāti, taisnās zarnas tamponi un dažādi izdalījumi, to skaitā: maksts, urīnizvadkanāls, brūces, acs, otiks un abscess.

Pārnesot paraugu transporta vidē uz laboratoriju, jāizvairās no barības pakļaušanas ekstremāliem vides apstākļiem (pārāk aukstam vai pārāk karstam). Jāizvairās arī no pēkšņām atmosfēras spiediena izmaiņām.

Laiks, kurā barotne spēj uzturēt mikroorganismu dzīvotspējīgu, ir atkarīgs no attiecīgā celma. Piemēram, Neisserias un Haemophilus ģints mikroorganismiem tie var būt dzīvotspējīgi līdz 24 stundām, bet tādi celmi kā Salmonella vai Shigella var ilgt dienas un pat nedēļas.

Ja tiek lēsts, ka parauga apstrāde var ilgt vairāk nekā 4 dienas, vēlams paraugu iesaldēt -70 ° C temperatūrā.

Parauga identifikācija transporta līdzeklī

Sagatavotajam transportlīdzeklim vai komerciālajai kultivēšanai jābūt etiķetei, kurā ievieto šādu informāciju:

Pacienta vārds un uzvārds: izvairās no sajaukšanas ar paraugu.

Identifikācijas numurs: ir ērti uzturēt pasūtījumu darbā.

Paraugu ņemšanas avots: palīdz bakteriologam izvēlēties piemērotu barotni.

Apmeklējošais ārsts: Dažreiz tas ir nepieciešams iespējamām konsultācijām.

Parauga ņemšanas datums un laiks: tas ir nepieciešams parauga pieņemšanai vai noraidīšanai atbilstoši laika posmam, kas pagājis no paraugu ņemšanas līdz saņemšanai laboratorijā.

Cita informācija, kuru būtu ļoti noderīgi pievienot:

Paredzamā diagnoze: vada īpašo barotņu pievienošanu atbilstoši aizdomām par diagnozi.

Ārstēšana ar antibiotikām: ir lietderīgi pievienot antibiotiku diagrammai.

Visa šī informācija ir būtiska, lai nodrošinātu pareizu paraugu apstrādi.

QA

Lai novērtētu Stjuarta barotnes darbību, zināmos celmus var inokulēt un turēt 25 ° C temperatūrā, piemēram: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae.

Visos gadījumos ir paredzēts atgūt attiecīgo mikroorganismu, kas saglabāts 24 stundas.

No otras puses, var izmantot citus celmus, piemēram: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 un Escherichia coli ATCC.

Visos gadījumos gaidāma bagātīga atveseļošanās līdz 96 stundām.

Ierobežojumi

Daži pētījumi apliecina, ka Stjuarta barotnē esošo glicerofosfātu var metabolizēt dažas koliformas, ieskaitot citas gramnegatīvas baktērijas, un tāpēc šajā barotnē tās vairoties.

Šis risks palielinās, jo ilgāk tiek aizkavēta parauga apstrāde. To ietekmē arī vidēja līmeņa Stuart iedarbība pārvadāšanas laikā.

Atsauces

1. "Transportēšanas vide (mikrobioloģija)." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 13. aprīlis, 10:36 UTC. 2019. gada 1. aprīlis. Pieejams vietnē: es.wikipedia.org
2. Microkit laboratorijas: barotnes. Stuart pārvadāšana. Pieejams vietnē: Pieejams vietnē: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stjuarta transporta līdzekļi. Pieejams: lablinsan.cl
4. Zinātniskais MDM. Stuart mikrobioloģiskās transportēšanas vides priekšrocības. Pieejams vietnē: mdmc Scientifica.com
5. Metrix laboratorijas. Stjuarts. 2017.Pieejams vietnē: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Beilija un Skota mikrobioloģiskā diagnostika. 12 ed. Redakcija Panamericana SA Argentīna.
7. Konemans E, Allens S, Janda V, Šrekenbergers P, Vins V. (2004). Mikrobioloģiskā diagnostika. 5. ed. Redakcija Panamericana SA Argentīna.