LAKTOPHENOL BLUE: RAKSTURLIELUMI, SASTĀVS, SAGATAVOŠANA, LIETOJUMI - ĶĪMIJA - 2025

Lactophenol zils vai zils kokvilna ir sagatavots ar vienu krāsu īpašībām. To izmanto klīniskajās laboratorijās, lai galvenokārt krāsotu sēnīšu struktūras, piemēram, hifus, dīgļu caurules un sporas.

Tas palīdz noteiktu sēņu iespējamā vai provizoriskā diagnozē, tomēr vienmēr ieteicams diagnozi pastiprināt ar specifiskākiem testiem, piemēram, bioķīmiskiem vai seroloģiskiem testiem.

Laktofenols zila traipa, uztriepes, kas iekrāsota ar laktofenola zilu, grafisks attēlojums, uz mikroskopa piestiprināts preparāts. Avots: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Laktophenol blue sastāv no pienskābes, anilīna zilā, glicerīna, fenola un dejonizēta ūdens. To var pagatavot laboratorijā vai arī to var iegādāties gatavu lietošanai. Pēc sagatavošanas tas ir gatavs lietošanai, nekādā gadījumā to nedrīkst atšķaidīt, jo šī darbība dos briesmīgus rezultātus.

Tā sastāvdaļu koncentrācija padara to par ideālu sēnīšu struktūru iekrāsošanai, jo fenols izvada pavadošo baktēriju mikrobiotu, bet pienskābe rada aizsargplēvi ap sēnīšu struktūru. Visbeidzot, anilīna zilajam ir afinitāte ievērot sēnītes struktūras.

Pamats

Ar laktofenola zilu tiek veikta noteiktas mikoloģiskās kultūras sēnīšu struktūru vienkārša krāsošana. To sauc par vienkāršu, jo tajā tiek izmantots tikai viens krāsviela.

Laktofenols zils, izņemot krāsošanu, darbojas arī kā parauga dzidrinātājs, pateicoties pienskābes un fenola kopīgai darbībai, turklāt fenols rīkojas kā kodinātājs un vienlaikus novērš mikroorganismu līzi, kavējot hidrolītiskos enzīmus, kas var būt klāt.

Kamēr pienskābe saglabā sēnīšu struktūru morfoloģiju.

No otras puses, anilīna zilajam īpašumam ir pielipt vai saistīties ar hitīnu saturošām struktūrām. Konstrukcijas krāso gaiši zilā krāsā.

Jāatzīmē, ka sēnīšu mikroorganismu, īpaši pelējuma, šūnu sienā ir hitīns, tāpēc šī krāsviela ir ideāli piemērota šo mikroorganismu iekrāsošanai.

raksturojums

Laktophenol blue šķīdums ir izteikti skābs, nedaudz duļķains, ūdens krāsojums ar gaiši zilu krāsu. Tas paliek stabils, ja to uzglabā temperatūrā no 15 ° C līdz 25 ° C. Pudele jātur pareizi aizvērta. Tas ir kairinošs un kodīgs ādai un gļotādām.

Sastāvs

Laktofenola zilā litra pagatavošanas formula ir šāda:

-250 g / L pienskābes

-1,0 g / L anilīns zils vai metil zils

-500 g / L glicerīna

-250 g / L fenola

-250 ml dejonizēta vai destilēta ūdens.

Fenolu izšķīdina iepriekš sasildītā ūdenī. Pienskābi un glicerīnu pievieno un ļoti labi samaisa. Visbeidzot, anilīna zils izšķīst. Tas atkal sajaucas un ir gatavs lietošanai.

80 ml laktofenolzilā šķīduma pagatavošanas porcijas ir šādas:

-20 g fenola kristāli

-20 ml pienskābes

-40 ml glicerīna vai glicerīna

-20 ml destilēta ūdens.

Izmantojiet

To izmanto sēnīšu struktūru krāsošanai un, izmantojot morfoloģiskās īpašības, kuras novērotas mikroskopiskā līmenī, lai varētu veikt paredzamu sēnītes diagnozi.

Process

Kultūru sēnīšu struktūru krāsošana

- Ņem tīru sēnītes kultūru, kuras struktūras ir jāievēro.

- Vēlams strādāt laminārās plūsmas pārsegā vai zem šķiltavas, izmantojot masku un cimdus, jo ir jāievēro bioloģiskās drošības standarti, jo lielāko daļu veidņu ir viegli izplatīt vidē un tāpēc rada briesmas operatoram.

- Uz priekšmetstikliņa uzliek pilienu laktofenols zila.

- Neliels labas kvalitātes līmlentes kvadrāts tiek sagriezts un ļoti uzmanīgi pielīmēts pie platīna roktura gala, jau sterilizēts un auksts.

- Platīna rokturis ir vērsts uz sēnīšu kolonijas virspusējo daļu, un kultūra ir ļoti uzmanīgi pieskārusies tieši tur, kur atrodas līmlente.

- Pēc tam to novieto priekšmetstikliņā un novieto pa labi uz laktofenolzilā piliena, rūpējoties, lai lente būtu perfekti pagarināta un ieeļļota ar krāsvielu. Platīna rokturis ir ļoti smalki noņemts.

- Uz lentes tiek uzlikts vēl viens laktofenols zila piliens, bet augšā - pārsegs. Nepielietojiet pārāk lielu spiedienu, lai neiznīcinātu sēnīšu struktūras, jo tās ir ārkārtīgi trauslas. Krāsvielai jāļauj iedarboties apmēram 3 līdz 4 minūtes.

- Pēc šī laika preparāts ir gatavs novērot mikroskopā ar palielinājumu 10X vai 40X. Ja nepieciešams novērot 100X, jāizmanto iegremdēšanas eļļa.

- Sēnīšu struktūras parasti iekrāsojas zilā krāsā, izņemot sēnīšu sēnītes, kuras saglabās raksturīgo brūno krāsu šāda veida sēnītēm.

Tieša bioloģiskā parauga krāsošana

Ja cita starpā ir nepieciešams pētīt tiešu bioloģisko paraugu, piemēram, krēpu, strutas, eksudātus, izdalījumus, tiem jāveic iepriekšēja parauga dekontaminācijas procedūra. Tam izmanto NaOH šķīdumu.

Matu paraugu gadījumā tos var tieši krāsot.

Vairākus skartos matiņus (kopā 10) ņem no iespējamiem kodekapīta bojājumiem (alopēti apgabali) un novieto uz slaida (no 3 līdz 4 matiņiem uz slaida). Pāris pilienus laktofenola zilā uzliek virsū un tūlīt pārklāj ar pārsegu.

Satveriet priekšmetstikliņu ar knaiblēm un viegli sildiet virs degļa. Lai to izdarītu, 3 līdz 4 ātri veiciet liesmu. Novērojiet mikroskopu pie 40X un meklējiet sporas ārpus matiem vai iekšpusē (attiecīgi ectothrix vai endothrix). Ja nepieciešams, pievienojiet iegremdēšanas eļļu un novērojiet pie 100X.

Dzemdes caurulītes iekrāsošana identificējot

Pēc iespējamās Candida albicans kultūras inkubēšanas cilvēka serumā 2 līdz 4 stundas 37 ° C temperatūrā, daļu šķīduma ņem un iekrāso ar laktofenola zilo. Preparātu novēro mikroskopā pie 40X. Dīgļa caurule ir klāt, un blastosporas iekrāsojas koši zilā krāsā.

Laktophenol drošības datu lapa

Nacionālā ugunsdrošības asociācija (NFPA) izveido ķīmisko vielu drošības datu lapu attiecībā uz risku, ko tā rada dažādos aspektos, tos simbolizē krāsains dimants un skaitlis no 0 Četri.

Bīstamība veselībai ir norādīta zilā krāsā, uzliesmojamība sarkanā krāsā, nestabilitāte vai reaģētspēja dzeltenā krāsā, un visi īpašie draudi ir baltā krāsā.

Veselība

Veselības risks, ko saskaņā ar NFPA rada laktofenols zils, ir 3. līmenis. Tas nozīmē, ka viela ir ārkārtīgi bīstama norijot vai tieši nonākot saskarē ar ādu vai gļotādu.

Tā ir ļoti kodīga un kairinoša viela.

Saskarē ar ādu un gļotādām tas izraisa smagus apdegumus.

Norijot, tas var izraisīt galvassāpes, apjukumu, letarģiju, bezsamaņu, elpošanas apstāšanos un pat nāvi.

Uzliesmojamība

Saskaņā ar NFPA, Lactophenol Blue ir uzliesmojamības pakāpe ar 1. pakāpi. Tas nozīmē, ka tas deg tikai tad, ja tas tiek uzkarsēts virs 94 ° C.

Nestabilitāte

Sarakstīti atbilstoši NFPA reaģētspējas ziņā 0 (nulle) līmenī. Tas nozīmē, ka tai nav reaģētspējas riska, tas ir, tā ir ķīmiski stabila viela.

Īpaša bīstamība

Tas nepiedāvā papildu īpašus draudus.

Atsauces

1. SAR laboratorija. Laktophenol Blue. 2010. Pieejams vietnē labsar.com.
2. Lietišķās klīniskās ķīmijas laboratorija. Laktophenol blue. 2015.Pieejams vietnē: cromakit.es
3. Merck laboratorijas. Lakofenola zilā mikroskopija šķīdumā. 2017.Pieejams vietnē: Lietotāji / Equipo / Lejupielādes
4. Avārijas karte. Laktophenol blue šķīdums sēnīšu krāsošanai. Universidad Pontificia Javeriana, Bogota Kolumbija. 2014.Pieejams vietnē: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Paņēmiens sēnīšu struktūru krāsošanai ar augu krāsvielām kā nepiesārņojošu alternatīvu. Bioagro, 2011; 23 (1): 65–68. Pieejams vietnē: Redalyc.
6. Laboratorijas multivide. Laktofenola kokvilnas zils. 2017. Pieejams vietnē: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, aktieris J, Dasgupta A. Bioķīmiskie testi un krāsošanas paņēmieni mikrobu identificēšanai. Science Direct, 2017; 61.-73. Pieejams no: Elsevier