SAFRANĪNS: ĪPAŠĪBAS, LIETOJUMS, PAŅĒMIENI, TOKSICITĀTE - ĶĪMIJA - 2025

Safranīna ir meriquinoide krāsu, kas nosaukts par tās ķīmisko struktūru, kuram divas benzenoid gredzenus un 2 quinoid gredzeniem, pēdējais ir tie, kas nodrošina krāsu sarkanā krāsā.

To īsajā formā sauc arī par dimetilsafarīnu vai bāzes sarkano 2, jo tā zinātniskais nosaukums ir 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenil-fenazinija hlordimetil-safranīns un ķīmiskā formula ir C ₂₀ H ₁₉ N ₄ Kl.

Safranīna ķīmiskā struktūra, kas norāda benzenoīdu un hinoīdu gredzenus / safranīna ūdens šķīdums. Avots: NEUROtiker rediģējis maģistrs. Marielsa Gil / LHcheM

Pastāv variants, ko sauc par trimetil-safranīnu, taču starp šīm divām vielām nav būtiskas atšķirības.

Safranīns ir monohromatiska krāsviela, un, atkarībā no ķīmiskās formulas īpašībām, tā ir pozitīvi lādēta viela. Tāpēc tai ir afinitāte pret negatīvi lādētām struktūrām. Šīs struktūras tiks iekrāsotas sarkanā krāsā.

Šis īpašums ļauj to izmantot daudzās histoloģiskās metodēs dažādu šūnu struktūru, gan eikariotu, gan prokariotu organismu krāsošanai.

Safranīns tiek izmantots kā kontrastviela svarīgās un labi zināmās metodēs ikdienas lietošanai bakterioloģijā. Šīs metodes ir: Gram-Hucker traips, Schaeffer Fulton trauks sporām vai baktēriju kapsulu krāsošanai, cita starpā.

raksturojums

Safrāna krāsa (garšviela, kas iegūta no Crocus sativus zieda stigmām) bija iedvesma šīs krāsas nosaukšanai. No termina safrāns nāk nosaukums safranīns. Tas ir saistīts ar lielo līdzību starp safrāna krāsu un krāsvielu, ko šī krāsviela nodrošina.

Safranīns ir pieejams kā kristāli vai pulveris, abos veidos šķīstot ūdenī. Safranīna krāsviela ir bez smaržas. Traipu struktūras sarkanas. Konstrukcijas, kas piesaista safranīna krāsvielu, sauc par safranofiliem.

Strukturāli safranīns ir sarežģīts, tā galos ir divi benzenoīda gredzeni, un centrā atrodas divi hinoīdu gredzeni, kur atrodams N ⁺ katjons . Konstrukcijas centrā ir sistēma, kas atbild par krāsas nodrošināšanu. Šīs īpašības dēļ šo krāsvielu klasificē II kategorijā.

Izmantojiet

Safranīns tiek izmantots dažādu struktūru krāsošanai. Īpaši izceļ Kulchitsky šūnas, kas atrodas kuņģa-zarnu traktā, ko sauc arī par enterohromafīna šūnām.

Tas spēj iekrāsot mikroorganismus, kas pieder Rickettsiaceae ģimenei. Tāpat to izmanto dažādās metodēs, piemēram, Kostera metodē, modificētā veidā, ko izmanto Brucella ģints baktēriju krāsošanai.

No otras puses, safranīns tiek izmantots Schaeffer Fulton sporu krāsošanas tehnikā un Gram-Hucker krāsošanā. Abos paņēmienos safranīns darbojas kā kontrastviela.

Pirmajā gadījumā sporas iegūst malahīta zaļo krāsu, bet pārējās struktūras ir sarkana ar safranīnu. Otrajā gadījumā gramnegatīvās baktērijas krāsas maiņas laikā zaudē violetā kristāla krāsu, tāpēc safranīns ir tas, kas gramnegatīvās baktērijas krāso sarkanā krāsā.

Turklāt bakterioloģijā safranīnu izmanto, lai pagatavotu Brucella agara barotnes ar safranīna atšķaidījumu 1: 5000. Šī barotne kalpo, lai atšķirtu Brucella suis sugas no pārējām sugām. Brucella melitensis un Brucella abortus aug šajā barotnē, bet B. suis tiek kavēta.

Agroindustriālajā nozarē safranīnu izmantoja ar 2,25% un atšķaida ar 1:10, lai notraipītu stublāju paraugus no cukurniedru rūpnīcas.

Šo augu parasti ietekmē baktērijas Leifsonia xyli subsp. xyli, kas bojā auga ksilēmu. Iekrāsotos stublājus novērtē, lai noteiktu ksilēma trauku funkciju.

Metodes bakterioloģijas jomā

Castañeda traipu r krāsošanai

Asins vai audu uztriepi ievieto buferšķīdumā (fosfāta buferšķīdums pH 7,6). Ļauj spontāni nožūt, pēc tam 3 minūtes pārklāj ar metilēnzilo un apmetina ar safranīnu. Rickettsiae ir zilā krāsā, kas kontrastē ar sarkano fonu.

Kostera traips modificēts

Fiksēšanai tiek izgatavota uztriepe un liesma šķiltavā. Pēc tam tas 1 minūtes tiek pārklāts ar 2 daļu piesātināta safranīna ūdens šķīduma un 3 daļu 1 mol / L KOH šķīduma maisījumu. Mazgāšanu veic ar destilētu ūdeni un notīra ar 1% karbolu metilēnzilo.

Ja paraugā ir Brucella ģints baktērijas, uz zila fona tās parādīsies oranžā krāsā.

Baktēriju kapsulas krāsošana

Baktēriju suspensijas maisījumu sagatavo ar Indijas tinti un pievieno safranīnu. Zem mikroskopa ap katru baktēriju kapsulu ar melnu fonu parādīsies sarkanīgs halo.

Sporas iekrāsošana

Izkliedē ar baktēriju suspensiju. Tad tas tiek fiksēts sildīšanai. Tas ir pārklāts ar 5% malahīta zaļu, bieži uzliesmo, līdz izdalās tvaiki. Procesu atkārto 6-10 minūtes. Visbeidzot, to mazgā ar ūdeni un 30 sekundes notur ar 0,5% safranīna. Bacili krāsojas sarkanā krāsā, un sporas ir zaļas.

Gram-Hucker traips

Izgatavo ar baktēriju suspensiju un nostiprina siltumā. Pārklājiet priekšmetstikliņu ar kristālvioletu 1 minūti. Tad lugolu kā kodināšanas šķīdumu ievieto 1 minūti. Pēc tam to balina ar acetona spirtu un visbeidzot 30 sekundes notur ar safranīnu.

Grampozitīvas baktērijas iekrāso zilgani violetas un gramnegatīvas baktērijas sarkanā krāsā.

Dažas laboratorijas ir pārtraukušas Gram-Hucker tehnikas izmantošanu, lai pieņemtu modificēto Gram-Kopeloff metodi. Pēdējā safranīnu aizstāj ar pamata fuksīnu. Tas notiek tāpēc, ka safranīns vāji iekrāso Legionella, Campylobacter un Brucella ģinšu sugas.

Metodes histoloģijas jomā

Kulchitsky šūnu krāsošana (enterohromafīni)

Audu sekcijas no kuņģa-zarnu trakta iekrāso ar sudraba hlorīdu. Pēc tam to atkrāso ar nātrija tiosulfātu un, visbeidzot, apkrāso ar safranīnu.

Kulchitsky šūnas izceļas ar melnbrūnu granulu klātbūtni.

Osteoartrīta traips

Tā kā safranīnam ir pozitīvs lādiņš, tas ļoti labi saistās ar glikozaminoglikānu karboksilgrupu un sulfātu grupām. Tie ir daļa no proteoglikāniem, kas veido locītavu skrimšļus. Šajā ziņā, krāsojot ar safranīnu O, var noteikt, vai ir vai nav skrimšļa zudums.

Skrimšļaudu audu zudumu var izmērīt, izmantojot Mankin skalu vai ko sauc arī par osteoartrīta skalu.

Metode ir izskaidrota turpmāk: histoloģisko sekciju iegremdē paplātē ar Veigerta dzelzs hematoksilīna šķīdumu, pēc tam izlaiž caur skābu spirtu un mazgā ar ūdeni.

Turpiniet krāsošanu, iegremdējot lapu ātri zaļā krāsā, to mazgā ar etiķskābi un tagad to iegremdē safranīnā O. Lai pabeigtu procesu, tas tiek dehidrēts, izmantojot spirtus dažādās koncentrācijās augošā secībā. Pēdējā posmā parauga skaidrībai nepieciešams ksilols vai ksilols.

Priekšmetstikliņus kondicionē ar Kanādas balzamu vai līdzīgu, ko var novērot mikroskopā.

Izmantojot šo paņēmienu, kodolus iekrāso melnā krāsā, kauls ir zaļš un skrimšļi, kur proteoglikāni ir sarkani.

Traipu makroaļģu identificēšanai

Pérez et al. 2003. gadā ierosināja vienkāršu un lētu paņēmienu makroaļģu krāsošanai. Paraugus sagatavo parafīna histoloģiskās daļās. Sadaļas tiek fiksētas ar 1% glicerīna, ļaujot tām pilnībā izžūt. Pēc tam to ievieto ksilolā, lai noņemtu parafīnu.

Sadaļu rehidratē, 2 min katrā no tām izlejot caur paplāšu sēriju, kas satur etanolu dažādās koncentrācijas pakāpēs (dilstošā secībā).

Pēc tam to 5 minūtes iekrāso ar 1% safranīna un 1% toluidīna zilā maisījuma 3: 1, abus pagatavojot ar 50% etanolu. Maisījumam pievieno trīs pilienus pikrīnskābes, kas darbojas kā kodinātājs.

Tad tas tiek dehidrēts, atkal izlaižot cauri spirta paplātēm, bet šoreiz augošā veidā. Visbeidzot, to noskalo ar ksilolu un paraugu sagatavo ar Kanādas balzamu, kas jānovēro.

Toksicitāte

Par laimi, safranīns ir krāsviela, kas nerada briesmas tiem, kas ar to rīkojas. Tas ir nekaitīgs krāsviela, tas nav kancerogēns un nav viegli uzliesmojošs.

Tiešs kontakts ar ādu vai gļotādu var izraisīt nelielu apsārtumu šajā vietā, bez lielām komplikācijām. Šim nolūkam skarto zonu ieteicams mazgāt ar lielu daudzumu ūdens.

Atsauces

1. Garsija H. Colorante safranina O. Veselības tehniķis, 2012; 1 (2): 83–85. Pieejams vietnē: medigraphic.com
2. Gila M. Grama traips: pamats, materiāli, tehnika un pielietojums. 2019.Pieejams vietnē: lifeder.com
3. Gil M. Spore krāsošana: pamatojums, paņēmieni un pielietojums. 2019.Pieejams vietnē: lifeder.com
4. Safranina. " Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2017. gada 7. marts, 10:39 UTC. 2019. gada 3. augusts, 20:49 lv.wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Noderīga krāsošanas metode Gracilariopsis tenuifrons un Gracilaria chilensis (Rhodophyta) anatomiskajā interpretācijā. Akts Bots. Venecu. 2003; 26 (2): 237-244. Pieejams vietnē: scielo.org.
6. Aleika baznīca, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Ksilēma asinsvadu funkcionalitātes un Leifsonia xyli subsp. xyli. Rev. Veg aizsardzība. 2007; 22 (1): 65–65. Pieejams vietnē: scielo.sld