TUMŠĀ LAUKA MIKROSKOPS: RAKSTURLIELUMI, DAĻAS, FUNKCIJAS - BIOLOĢIJA - 2025

Tumšā lauka mikroskops ir īpašs optisko instrumentu izmanto dažās laboratorijās. Tas ir modifikācijas rezultāts, kas veikts, izmantojot gaišā lauka mikroskopiju. Tumšā lauka mikroskopiju var veikt, izmantojot trans-apgaismojumu vai epi-apgaismojumu.

Pirmais ir balstīts uz to, ka tiek bloķēti gaismas stari, kas tieši nonāk pie kondensatora, izmantojot ierīces, kas darbojas pirms gaismas stari sasniedz kondensatoru.

Tumšā lauka mikroskops / Treponēmas, kas redzamas tumšā lauka mikroskopos. Avots: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu un Patrick L McGeer

Tumšais lauks ar caurspīdīgu gaismu ļauj izcelt struktūras, spējot novērot ārkārtīgi plānas daļiņas. Uz tumša fona struktūras ir redzamas ar nelielu refrakciju vai spilgtumu.

Kamēr epi apgaismojuma efekts tiek panākts ar krītošu vai slīpu gaismu. Šajā gadījumā mikroskopam jābūt aprīkotam ar īpašu pusmēness formas filtru.

Ar krītošu apgaismojumu novērotajām konstrukcijām raksturīgs vizuāls efekts ar augstu reljefu. Šis īpašums ļauj izcelt suspendēto daļiņu malas.

Atšķirībā no spilgtās lauka mikroskopijas, tumšā lauka mikroskopija ir īpaši noderīga, lai vizualizētu freskas priekšmetstikliņus, kuros ir suspendētas daļiņas, bez jebkādas iekrāsošanas.

Tomēr tam ir vairāki trūkumi, ieskaitot to, ka to nevar izmantot sausiem vai krāsotiem preparātiem. Tam nav laba izšķirtspēja. Turklāt, lai nodrošinātu labu attēlu, mērķu skaitliskā apertūra nedrīkst pārsniegt kondensatora apertūru.

raksturojums

Tumšā lauka mikroskopa sastāvs rada svarīgas modifikācijas attiecībā pret gaišo lauku, jo abu mikroskopiju pamati ir pretēji.

Kamēr gaišajā laukā gaismas stari ir koncentrēti tā, lai tie tieši iziet cauri paraugam, tumšajā laukā sijas ir izkliedētas tā, ka paraugu sasniedz tikai slīpi stari. Tad tos izkliedē viens un tas pats paraugs, pārraidot attēlu objektīva virzienā.

Ja jums būtu jākoncentrējas uz priekšmetstikliņu bez parauga, tiks novērots tumšs aplis, jo bez parauga nekas neizkliedē gaismu objekta virzienā.

Lai iegūtu vēlamo efektu redzes laukā, ir nepieciešami īpaši kondensatori, kā arī diafragmas, kas palīdz kontrolēt gaismas starus.

Tumša lauka skata laukā suspensijas elementi vai daļiņas izskatās gaišas un refrakcijas, bet pārējais lauks ir tumšs, veidojot perfektu kontrastu.

Ja tiek izmantots slīps vai krītošs apgaismojums, novērotajās konstrukcijās tiek iegūts malas efekts ar lielu reljefu.

Tumšā lauka mikroskopa daļas

Avots: amazon.com

-Mehāniska sistēma

Caurule

Tā ir ierīce, caur kuru objekta atspoguļotais un palielinātais attēls pārvietojas, līdz tas sasniedz okulāru vai okulāru.

Maisīt

Tas ir atbalsts, kur atrodas dažādi mērķi. Mērķi nav fiksēti, tos var noņemt. Revolveri var pagriezt tādā veidā, ka mērķi var mainīt, kad operatoram tas ir vajadzīgs.

Makro skrūve

Šo skrūvi izmanto, lai fokusētu paraugu, tā virzās uz priekšu vai atpakaļ, lai tuvinātu paraugu mērķim vai tālāk no tā, un kustība ir groteska.

Mikrometra skrūve

Mikrometra skrūvi pārvieto uz priekšu vai atpakaļ, lai paraugu pārvietotu tuvāk mērķim vai tālāk no tā. Mikrometrisko skrūvi izmanto ļoti smalkām vai smalkām kustībām, gandrīz nemanāmām. Tas ir tas, kas sasniedz galveno uzmanību.

Platenis

Tas ir balsts, kurā paraugs atradīsies uz priekšmetstikliņa. Tam ir centrāla atvere, caur kuru iziet gaismas stari. Kad makro un mikrometra skrūves tiek pārvietotas, pakāpe iet uz augšu vai uz leju, atkarībā no skrūves kustības.

Mašīna

Pārnēsāšana ļauj visu paraugu šķērsot mērķim. Atļautās kustības notiek uz priekšu un atpakaļ un otrādi, un no kreisās uz labo un otrādi.

Turot knaibles

Tie atrodas uz skatuves, ir izgatavoti no metāla un ir paredzēti, lai noturētu slaidu, lai novēršanas laikā tas nevarētu ripot. Ir svarīgi, lai paraugs tiktu fiksēts, kamēr tas tiek novērots. Stiprinājumi ir precīzi izmērā, lai saņemtu slaidu.

Rokas vai rokturis

Rokas savieno cauruli ar pamatni. Tā ir vieta, kur jātur mikroskops, kad to paredzēts pārvietot no vienas puses uz otru. Ar vienu roku satver roku, bet ar otru roku tur pamatni.

Pamatne vai pēda

Kā norāda nosaukums, tas ir mikroskopa pamats vai balsts. Pateicoties pamatnei, mikroskops spēj palikt fiksēts un stabils uz līdzenas virsmas.

-Optiskā sistēma

mērķus

Tās ir cilindriskas formas. Viņu apakšā ir objektīvs, kas palielina attēlu, kas nāk no parauga. Mērķi var būt dažādi. Piemērs: 4.5X (palielināmais stikls), 10X, 40X un 100X (iegremdēšanas objekts).

Iegremdēšanas mērķis ir nosaukts tāpēc, ka tas prasa dažus pilienus eļļas ievietot starp objektīvu un paraugu. Pārējos sauc par sausiem mērķiem.

Mērķi tiek uzdrukāti ar raksturīgajām īpašībām.

Piemērs: ražotāja firmas zīme, lauka izliekuma korekcija, aberācijas korekcija, palielinājums, skaitliskā apertūra, īpašās optiskās īpašības, iegremdēšanas vide, caurules garums, fokusa attālums, pārsega biezums un koda gredzens krāsa.

Objektīviem ir priekšējais objektīvs, kas atrodas apakšā, un aizmugurējais objektīvs, kas atrodas augšpusē.

Okulāri

Vecie mikroskopi ir monokulāri, tas ir, tiem ir tikai viens okulārs, un mūsdienu mikroskopi ir binokļi, tas ir, tiem ir divi okulāri.

Okulāri ir cilindriski un dobi. Tiem ir saplūstošas ​​lēcas, kas paplašina objektīva izveidoto virtuālo attēlu.

Okulārs pievienojas caurulei. Pēdējais ļauj objekta pārraidītajam attēlam sasniegt okulāru, kurš to atkal palielinās.

Okulāra augšējā daļā ir objektīvs, ko sauc par okulāru, un tā apakšējā daļā atrodas objektīvs, ko sauc par kolektoru.

Tam ir arī diafragma, un atkarībā no tā, kur tas atrodas, tam būs nosaukums. Tos, kas atrodas starp abiem objektīviem, sauc par Huygens okulāru, un, ja tas atrodas pēc 2 objektīviem, to sauc par Ramsden okulāru. Lai gan ir daudz citu.

Okulāra palielinājums svārstās no 5X, 10X, 15X vai 20X atkarībā no mikroskopa.

Operators var apskatīt paraugu caur okulāru vai okulāriem. Dažiem modeļiem kreisajā okulārā ir gredzens, kas ir pārvietojams un ļauj pielāgot attēlu. Šo regulējamo gredzenu sauc par dioptrijas gredzenu.

-Apgaismošanas sistēma

Lampa

Tas ir apgaismojuma avots un atrodas mikroskopa apakšā. Gaisma ir halogēna un tiek izstarota no apakšas uz augšu. Kopumā lampa, kurai ir mikroskopi, ir 12 V.

Membrāna

Tumšā lauka mikroskopu diafragmai trūkst varavīksnenes; šajā gadījumā tas neļauj stariem, kas nāk no luktura, tieši sasniegt paraugu, tikai slīpi stari pieskarsies paraugam. Sijas, kuras izkliedē paraugā esošās struktūras, ir tās, kuras šķērsos mērķi.

Tas izskaidro, kāpēc struktūras tumšā laukā izskatās gaišas un mirdzošas.

Kondensators

Tumšā lauka mikroskopa kondensators atšķiras no gaišā lauka kondensatora.

Ir divi veidi: refrakcijas kondensatori un atstarojošie kondensatori. Pēdējais savukārt ir sadalīts divās kategorijās: paraboloīdi un kardioīdi.

Refrakcijas kondensatori

Šāda veida kondensatoram ir disks, kas paredzēts gaismas staru laušanai, to var novietot virs priekšējā objektīva vai aizmugurē.

Šāda veida kondensatoru ir ļoti viegli improvizēt, jo pietiek ar kondensatora priekšējā objektīva priekšā novietot no melna kartona izgatavotu disku, kas ir mazāks par objektīvu (diafragma).

Izmantojot šo galu, spilgtā lauka gaismas mikroskopu var pārveidot par tumšā lauka mikroskopu.

Atstarojošie kondensatori

Tos izmanto stereoskopiskos mikroskopos. Ir divi veidi: paraboloīdi un kardioīdi.

• Paraboloīdi: tiem ir tāda veida izliekums, ko sauc par paraboloīdiem, jo tie ir līdzīgi paraboļiem . Šis kondensatora tips tiek plaši izmantots sifilisa izpētē, jo tas ļauj novērot treponēmas.
• Kardioīds : kondensatora izliekums ir līdzīgs sirdij, tāpēc nosaukums "kardioīds", kondensatoram ir tāds pats nosaukums. Tam ir regulējama membrāna.

Iespējas

-To izmanto, lai izpētītu Treponema pallidum klātbūtni klīniskajos paraugos.

-Tas ir arī noderīgi novērot Borrelias un Leptospiras.

- Tas ir ideāli piemērots šūnu vai mikroorganismu in vivo uzvedības novērošanai, ja vien nav nepieciešams detalizēt specifiskas struktūras.

- Ideāli ir izcelt kapsulu vai mikroorganismu sienu.

Priekšrocība

- Lētāki ir tumšā lauka mikroskopi ar refrakcijas kondensatoru.

-Tā lietošana ir ļoti noderīga 40x palielinājumā.

-Tie ir ideāli, lai novērotu paraugus, kuru refrakcijas koeficients ir līdzīgs barotnei, kurā tie atrodas. Piemēram, šūnas kultūrā, raugs vai kustīgas baktērijas, piemēram, spirochetes (Borrelias, Leptospiras un Treponemas).

-Šūnu var novērot in vivo, kas ļauj novērtēt tās izturēšanos. Piemēram, Brownian kustība, kustība ar flagella, pārvietošanās ar pseidopodiem izdalīšanos, mitotiskas dalīšanās process, kāpuru izšķilšanās, raugu pumpurēšana, fagocitoze, cita starpā.

-Tas ļauj izcelt konstrukciju malas, piemēram, kapsulu un šūnas sienu.

-Ir iespējams analizēt nesadalītas daļiņas.

-Krāsvielu lietošana nav nepieciešama.

Trūkumi

-Pievienojot preparātus, jāievēro īpaša piesardzība, jo, ja tie ir pārāk biezi, tas netiks labi novērots.

- Attēlu izšķirtspēja ir zema.

- Tumšā lauka mikroskopiem, kuros tiek izmantoti refrakcijas kondensatori, ir ļoti zems spožuma procents.

-Lai uzlabotu attēla kvalitāti ar iegremdējamo objektīvu (100X), ir jāsamazina objektīvu skaitliskā diafragma un tādējādi jāpalielina apgaismojošā konusa diafragma. Šim nolūkam ir svarīgi iekļaut papildu membrānu, kas var regulēt objekta skaitlisko atvērumu.

-Jūs nevarat vizualizēt sausus vai krāsainus preparātus, ja vien tie nav svarīgi krāsvielas.

-Tas neļauj vizualizēt noteiktas struktūras, īpaši iekšējās.

-Dumšā lauka mikroskopi ir dārgāki.

Atsauces

1. "Tumšā lauka mikroskops." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 26. augusts, 00:18 UTC. 2019. gada 30. jūnijs, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Leptospirozes diagnoze no asins paraugiem un kultūras, novērojot tumšā lauka mikroskopā. Biomedicīnas. 2008; 28 (1): 7-9. Pieejams vietnē: scielo.org
3. Rodrigess F. Optisko mikroskopu veidi. Klīnisko un biomedicīnas laboratoriju emuārs. Pieejams vietnē: franrzmn.com
4. Wikipedia līdzautori. Tumšā lauka mikroskopija. Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2018. gada 19. oktobris, 00:13 UTC. Pieejams vietnē: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Tumšā lauka mikroskopijas, kultūras un komerciālo seroloģisko komplektu novērtējums leptospirozes diagnostikā. Indijas J Med mikrobiols. 2015; 33 (3): 416–21. Pieejams: nlm.nih.gov