- Antistreptolizīna O antivielu kvantitatīvā noteikšana
- ASTO tehnikas pamats
- Metodes
- - Puskvantitatīva tehnika
- Interpretācija
- - Kvantitatīvā tehnika
- Interpretācija
- Atsauces vērtība
- ieteikumi
- Patoloģijas ar paaugstinātu antistreptolizīna O titru
- Post streptokoku autoimūnas slimības
- Reimatiskais drudzis
- Akūts glomerulonefrīts
- Atsauces
O ASO ir antiviela radīts reaģējot uz infekciju, ko izraisa Streptococcus pyogenes, kas pazīstams arī kā Streptococcus beta-hemolītisko A. Šis grupa ražo divus eksotoksīnus ar hemolītisko aktivitāte zvaniem streptolysins "S" un "O" .
Streptolizīns S ir atbildīgs par beta hemolīzi, kas notiek asins agarā, un, lai arī tas ir toksisks noteiktām imūnsistēmas šūnām, tas nav antigēns. Kaut arī streptolizīns O, būdams labils pret skābekli, ir atbildīgs par hemolīzi, kas notiek zem asiņu agara, un tā ir antigēna.
Streptococcus pyogenes / Diagramma par to, kas notiek ASTO testā (aglutinācijas reakcija). (Antivielas, kas piesaistītas lateksa daļiņām, kuras satur specifisko antigēnu). Avots: Lietotājs: Graham Beards / Alejandro Porto
Tāpēc, kad imūnsistēmas šūnas mijiedarbojas ar streptolizīnu O, rodas specifiska imūnreakcija, kas ģenerē B limfocītu aktivizāciju.Šīs šūnas rada antivielas, kas vērstas pret streptolizīnu O. Tāpēc antivielas tiek sauktas antistreptolizīns O.
Streptococcus pyogenes rada dažādas patoloģijas, starp kurām ir: tonsilīts, erysipelas, impetigo, puerperal drudzis, skarlatīns un septicēmija. Anti-streptolizīna O antivielas parādās 8 līdz 30 dienas pēc infekcijas sākuma.
Lielākā daļa šo infekciju ir ļoti izplatītas populācijā, tāpēc cilvēkiem ir raksturīgi antistreptolizīna O antivielas asinīs. Zems titrs norāda uz iepriekšēju šīs baktērijas infekciju, bet augsts vai augošs titrs norāda uz nesenu vai notiekošu infekciju.
Antistreptolizīna O antivielu kvantitatīvā noteikšana
Laboratorijā anti-streptolizīna "O" antivielu titru var izmērīt, izmantojot seroloģisko testu. Antistreptolizīna O (ASTO) tests ir balstīts uz aglutinācijas reakciju ar lateksu.
To var izdarīt daļēji kvantitatīvi, ziņošanu var izteikt ar krustiņiem vai arī titrēt. Ir normāli un nenozīmīgi atrast vērtības līdz 200 SV / ml vai Todd vienības / ml. Virs šīs vērtības to uzskata par pozitīvu un klīniski nozīmīgu.
Šis tests neprasa pacienta badošanos. Serumu izmanto kā paraugu, tas ir, pacienta asinis ņem un ievieto mēģenē bez antikoagulanta, pēc tam centrifugē, lai iegūtu serumu.
ASTO tehnikas pamats
Metode izmanto lateksa daļiņas kā atbalstu, lai fiksētu streptolizīna O antigēnu. Uzsūkušās antigēna daļiņas reaģē ar pacienta serumu. Ja pacientam ir antistreptolizīna O antivielas, tās saistās ar antigēnu, kas piestiprināts pie lateksa daļiņām.
Šī saistīšanās izraisa aglutināciju, kas ir makroskopiski redzama. Reakcijas intensitāte ir tieši proporcionāla klāt esošo antivielu koncentrācijai.
Metodes
- Puskvantitatīva tehnika
Reakcijas intensitāti var daļēji kvantitatīvi izteikt ar krustiņiem. Lai to izdarītu, ņem seroloģiskās reakcijas plāksni un ievieto:
50 µl seruma un 50 µl ASTO reaģenta. Labi samaisiet ar koka zobu bakstāmais un uz 2 minūtēm ievietojiet automātiskajā maisītājā. Ievērojiet. Ja automātiskais rotators nav pieejams, tas jādara manuāli.
Interpretācija
Suspensija bez gabaliņiem (vienveidīga): negatīva
1. + = vāja reakcija
2. ++ = viegla reakcija
3. +++ = mērena reakcija
4. ++++ = spēcīga reakcija
Serumus, kas ir pozitīvi ar 3 un 4 krustiņiem, var kvantificēt.
- Kvantitatīvā tehnika
Titra kvantitatīvai noteikšanai veic sērijveida atšķaidījumus 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.
Lai to izdarītu, rīkojieties šādi: ņem 4 testa mēģenes vai Kahn mēģenes un visām tām uzliek 0,5 ml fizioloģiskā šķīduma. Tad pirmajā mēģenē pievieno 0,5 ml pacienta seruma. Labi sajauc. Šī caurule atbilst 1: 2 atšķaidījumam.
Pēc tam 0,5 ml pārnes 2. mēģenē un labi samaisa. Šī caurule atbilst 1: 4 atšķaidījumam un tā tālāk, līdz tiek sasniegts vēlamais atšķaidījums.
Ņem 50 μl katra atšķaidījuma un reaģē ar 50 μl ASTO reaģenta uz aglutinācijas plāksnes, kā paskaidrots daļēji kvantitatīvā tehnikā.
Interpretācija
Ņem vērā augstāko atšķaidījumu, kurā novēro redzamu aglutināciju. Aprēķini tiek veikti šādi:
ASTO = augstākā pozitīvā atšķaidījuma apgrieztais lielums x metodes jutība (konstante).
Piemērs: pacients ar pozitīvu reakciju līdz 1: 8
ASTO = 8 x 200 SV / ml = 1600 SV / ml vai Todd vienības / ml.
Atsauces vērtība
Normāls pieaugušais: līdz 200 SV / ml
Normāli bērni: līdz 400 SV / ml
ieteikumi
Lai pārliecinātos, ka reaģents ir optimālā stāvoklī, ieteicams pacientiem veikt pozitīvu un negatīvu kontroli. Ja pozitīvā kontrole neaglutē vai negatīvā kontrole neaglutē, reaģentu nevar izmantot.
Reakcija jāinterpretē pēc 2 minūtēm, pēc šī laika tā nav derīga, ja notiek aglutinācija. Tie ir nepatiesi pozitīvi.
Hiperlipemiskie serumi traucē reakciju. Viņi var sniegt nepatiesas pozitīvas atsauksmes.
Izolēta ASTO vērtība nav ļoti noderīga. Tam jāpievieno simptomi.
Turklāt, ja ir aizdomas par reimatisko drudzi vai post-streptokoku glomerulonefrītu, ieteicams veikt vismaz 2 ASTO mērījumus, lai parādītu antistreptolizīna O līmeņa paaugstināšanos un tādējādi apstiprinātu diagnozi.
Patoloģijas ar paaugstinātu antistreptolizīna O titru
Anti-streptolizīna antivielas palielinās pēc tam, kad cieš no Streptococcus pyogenes vai A grupas ß-hemolītiskās Streptococcus infekcijas.
Starp tiem ir: akūts faringīts, skarlatīns, impetigo, erysipelas, puerperal drudzis un septicēmija.
Dažiem pacientiem, kuri cietuši no nesenām vai atkārtotām streptokoku infekcijām, var attīstīties autoimūnas slimības kā post-streptokoku infekcijas sekas vai komplikācijas, piemēram, akūts glomerulonefrīts un reimatiskais drudzis.
Post streptokoku autoimūnas slimības
Reimatiskais drudzis
Tā ir iekaisuma komplikācija vai sekas, kas var parādīties 1 līdz 5 nedēļas pēc streptokoku infekcijas. Antistreptolizīna O titri ievērojami palielinās 4 līdz 5 nedēļas pēc slimības sākuma.
Augsts ASTO titrs nosaka diagnozi, bet nav saistīts ar slimības smagumu, un tā samazināšanās nenozīmē uzlabošanos.
Antistreptolizīna O antivielas savstarpēji reaģē pret kolagēnu un muskuļu šķiedrām, cita starpā ietekmējot noteiktus orgānus (sirdi, ādu, locītavas un nervu sistēmu).
Šī komplikācija vai sekas rodas ar sirdsdarbības traucējumiem, drudzi, savārgumu, nepūstā migrējošo poliartrītu, horeju utt.
Akūts glomerulonefrīts
Akūts glomerulonefrīts ir neapturīga sekve, kas rodas antigēna-antivielu kompleksu nogulsnēšanās dēļ uz glomerulārā pagraba membrānas.
Streptokoku infekciju radīto antigēna-antivielu kompleksu (ag-ac) veidošanās un cirkulācija var izraisīt eksudatīvas izmaiņas un glomerulu iekaisumu ar proteīnūriju un hematūriju.
Šie ag-ac kompleksi tiek nogulsnēti glomerulā un aktivizē komplementa kaskādi, izraisot glomerulāru endotēlija bojājumus. Šī iemesla dēļ to uzskata par autoimūnu slimību, jo indivīda imūnsistēma bojā paša audus.
Antistreptolizīna O antivielas ir ļoti augstas, un komplementa līmenis ir zems.
Atsauces
- Wiener laboratorijas. ASO latekss. 2000.Pieejams vietnē: wiener-lab.com.ar
- Wikipedia līdzautori. "Anti-streptolizīns O." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija, 2019. gada 23. janvāris. Web. 2019. gada 19. jūlijs.
- Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolizīna O titrs veselībā un slimībās: līmeņi un nozīmīgums. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Pieejams: ncbi.nlm.nih
- Sen E, Ramanan A. Kā lietot antistreptolizīna O titru. Arch Dis bērnu izglītības prakse, 2014. gads; 99 (6): 231–8. Pieejams: ncbi.nlm.nih
- Konemans E, Allens S, Janda V, Šrekenbergers P, Vins V. (2004). Mikrobioloģiskā diagnostika. (5. izd.). Argentīna, Panamericana SA redakcija
- González M, González N. 2011. Medicīniskās mikrobioloģijas rokasgrāmata. 2. izdevums, Venecuēla: Karabobo universitātes plašsaziņas līdzekļu un publikāciju direktorāts.