Agars Salmonella Shigella pazīstams arī kā SS agara ir selektīvs, un starpība vidēji mēreni, īpaši paredzēti izolācijai enteropathogenic baktēriju ģinšu Salmonella un Shigella, gan vides paraugos, piemēram, klīniskā.
SS agaram ir sarežģīts sastāvs; To veido gaļas ekstrakts, peptons, laktoze, žults sāļi, nātrija citrāts, nātrija tiosulfāts, dzelzs citrāts, agars, neitrāls sarkans, spilgti zaļš un destilēts ūdens. Ņemot vērā lielo selektivitāti, var sēt paraugus ar bagātīgu jauktu floru.
SS agars ar Salmonella sp. Avots: Manurx27, no Wikimedia Commons
Mikrobioloģijas laboratorijās Salmonella-Shigella barotne tiek plaši izmantota, lai izpētītu Salmonella un Shigella klātbūtni caurejas izkārnījumu paraugos, notekūdeņos, dzeramajā ūdenī un pārtikā.
Dažreiz ir nepieciešams izmantot iepriekš bagātinātus buljonus (laktozes buljonu) un bagātināšanas buljonus (selenīta cistīna buljonu), lai atgūtu Salmonella celmus.
Šīs darbības ir vajadzīgas, ja ir aizdomas par salmonellu klātbūtni ļoti mazā daudzumā vai ja celmu var ļaunprātīgi izmantot rūpnieciskajai ražošanai raksturīgie procesi, galvenokārt pārstrādātie pārtikas produkti. Ieteicams arī bagātināt izkārnījumu paraugus no pacientiem, kuri ārstēti ar antibiotikām.
Pēc tam bagātināto buljonu var iesēt Salmonella-Šigella agarā un citos līdzīgos barotnēs, piemēram, ksilozes agarā, lizīna deoksiholātā (XLD) un zarnu trakta Hektoen agarā (HE).
Pamats
Katrai Salmonella-Shigella barotnes sastāvdaļai ir īpaša funkcija, un maisījums kopumā nodrošina to raksturojošās īpašības.
Barojošs spēks
Gaļas ekstrakts un peptons (sagremots ar kazeīnu un dzīvnieku audiem) nodrošina nepieciešamās barības vielas (slāpekli, oglekli un vitamīnus) mikroorganismu attīstībai, kas spēj izturēt pārējos komponentus.
Konsekvence
Agars-agars ir atbildīgs par barotnes cietās konsistences nodrošināšanu.
Izvēles
Šī barotne ir ļoti selektīva, jo satur žults sāļus, nātrija citrātu un spilgti zaļu. Tāpēc tas kavē visu grampozitīvo baktēriju un visvairāk gramnegatīvo baktēriju augšanu, ieskaitot dažas koliformas.
Kaut arī Salmonella ģints baktērijas un daži Shigella celmi atbalsta šos savienojumus.
Galvenokārt Salmonella ģints ir ļoti izturīga pret žults sāļiem, tik daudz, ka tās spēj dzīvot dažu pārnēsātāju pacientu žultspūslī, kuri pastāvīgi izdala baktērijas izkārnījumos.
Diferenciālis
Laktoze ir raudzējamais ogļhidrāts, kas palīdz atšķirt laktozi fermentējošos celmus no nefermentējošajiem. Par šo īpašību liecina pH indikatora klātbūtne, kas šajā vidē ir fenola sarkans.
Laktozes fermentācijas celmi dod sarkanās kolonijas, bet nefermentējošie celmi ir bezkrāsaini. Šī īpašība ir svarīga, jo Salmonella un Shigella neraudzē laktozi.
No otras puses, šī barotne satur nātrija tiosulfātu kā sulfīda avotu un dzelzs citrātu kā dzelzs avotu. Abi savienojumi spēj atšķirt baktērijas, kas spēj radīt sērūdeņradi. Tie reaģē, veidojot redzamas, nešķīstošas melnā dzelzs sulfīda nogulsnes.
Šis īpašums ir atrodams dažos Salmonella ģints celmos. Parasti to kolonijas ir plakanas un bezkrāsainas ar melnu punktu tās centrā. Pārējie salmonellas nerada H 2 S un attīstās kā bezkrāsainas kolonijas.
No otras puses, Shigella ģints kolonijas ir plakanas un bezkrāsainas, bez blackenēšanas.
Sagatavošana
Šo barotni ir ļoti vienkārši pagatavot.
Nosver 63 g dehidrētas komerciālās barotnes un izšķīdina litrā destilēta ūdens. Sildiet šķīdumu un samaisiet. Maisījumu var vārīt līdz minūtēm.
Šo barotni nedrīkst autoklāvot. Pēc izšķīšanas to pasniedz tieši uz vienreizējām vai dubultā sterilām plāksnēm.
Kad tie sacietē, tos apgrieztā veidā sakārto uz trombocītiem un līdz lietošanai uzglabā ledusskapī (2–8 ° C).
Pēc pagatavošanas barotnei jāpaliek pie pH 7,2 ± 0,2 un ar oranži sarkanu krāsu.
Pirms paraugu iesēšanas ir svarīgi ļaut plāksnēm sasilt. Oriģinālo paraugu var tieši iesēt, izlejot materiālu uz agara daļas un pēc tam no tās izšļakstot.
Ja izmantojat bagātinātus buljonus, daļu selenīta buljona izlejiet un sējiet ar drigalski lāpstiņu.
Inkubē aerobiozē 24 stundas 37 ° C temperatūrā.
Paturiet prātā, ka sveramo gramu skaits un barotnes galīgais pH dažādās tirdzniecības vietās var atšķirties. Vidējā bāze vienmēr sniedz norādes tās sagatavošanai.
Izmantojiet
To bieži izmanto izkārnījumu kultūru analīzē un notekūdeņu, dzeramā ūdens un pārtikas paraugu mikrobioloģiskos pētījumos.
Bieži sagatavo dubultās plāksnes, vienā pusē ievieto Salmonella-Shigella agaru, bet otrā - XLD agaru.
Ierobežojumi
-Daži Šigella celmi šajā barotnē neaug. Tādēļ nav ieteicams šīs ģints primārajai izolēšanai.
- Neviena caurspīdīga kolonija ar melnu centru neliecina par Salmonella; Lai izdarītu pareizu identifikāciju, jāveic bioķīmiskie testi, jo dažu Proteus celmu kolonijas neatšķiras no Salmonella kolonijām.
- Dehidrētai barotnei ir jārūpējas par pakļaušanu videi, jo tā ir ļoti higroskopiska. Tāpēc tas jātur sausā un labi noslēgtā vidē. Atvērts ļoti īsu laiku.
- Visu laiku žults sāļi no barības var izgulsnēties, agarā veidojot līdzīgu attēlu, bet tas neietekmē rezultātus.
-Daži Šigella celmi var lēnām raudzēt laktozi.
QA
Lai pārbaudītu, vai barotne darbojas pareizi, ieteicams stādīt zināmus vai sertificētus kontroles celmus un novērot, vai augšana atbilst paredzētajām īpašībām.
Šim nolūkam var izmantot E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium vai Enterococcus faecalis celmus.
Gaidāmie rezultāti ir:
Enterobakteri un Klebsiella ------ lielas kolonijas un sarkani vai rozā mucoīdi.
Shigella flexneri ---------- caurspīdīgas vai bezkrāsainas plakanas kolonijas.
Salmonella typhimurium ------ bezkrāsainas kolonijas ar melniem centriem.
Enterococcus faecalis -------- pilnīga inhibīcija.
Atsauces
- Difco Francisco Soria Melguizo laboratorijas. Salmonella-Šigella agars. 2009.Pieejams vietnē: f-soria.es
- BD laboratorija. BD Salmonella-Shigella Agars. 2013.Pieejams vietnē: bd.com
- Britannia laboratorijas. Salmonella-Šigella agars. 2015.Pieejams vietnē: britanialab.com
- Valtek diagnostika. Salmonella-Šigella agars (SS agars), 2010. gads. Pieejams vietnē andinamedica.com
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Beilija un Skota mikrobioloģiskā diagnostika. 12 ed. Redakcija Panamericana SA Argentīna.
- Konemans E, Allens S, Janda V, Šrekenbergers P, Vins V. (2004). Mikrobioloģiskā diagnostika. 5. ed. Redakcija Panamericana SA Argentīna.