KONGO SARKANAIS: RAKSTUROJUMS, SAGATAVOŠANA UN PIELIETOJUMS - BIOLOĢIJA - 2025

Kongosarkanā ir Azokrāsvielu olbaltumvielas, kondensèjot diazonija sāli un aktīvu aromātisko gredzenu veidojas. Šī viela spēj absorbēt elektromagnētisko starojumu redzamajā spektrā, tāpēc tai ir intensīva krāsa.

Tas ir negatīvi uzlādēts. Tāpēc tai ir afinitāte pret pozitīvi uzlādētām šūnu sastāvdaļām, piemēram, noteiktām olbaltumvielām. Tā krāsa mainās atkarībā no pH līmeņa. Šajā ziņā, ja barotne ir skāba (<nekā pH 3), krāsa ir izteikti zila. Starp pH3 - pH 5,2 tā ir fuksija (pagrieziena zona), un ar> pH 5,2 krāsa ir dziļi sarkana.

Dehidrēts Kongo sarkanais un Kongo sarkanais koloidālais šķīdums. Avots: Pixinio.com un Wikipedia.com

Tā ir ļoti universāla viela, jo tai ir vairāki lietojumi. To izmantoja kā krāsvielu tekstilrūpniecībā, kā arī šūnām un audumiem.

Izgatavot barotnes, kas mēra fermentatīvo darbību, kā pH indikatoru, kā kontroles vielu spektrofotometru pareizas darbības novērtēšanā, bioplēves veidošanās pētījumos vai amiloīdu diagnostikā.

Tāpat tas ļāva atšķirt baktēriju un sēnīšu serotipus, identificējot specifiskas struktūras to sieniņās (lipopolisaharīdi).

Raksturojums Kongo sarkans

Šo vielu Bklāgers atklāja 1884. gadā. Tas ir diazonija atvasinājums, ko veido benzidīna bisdiazoīnskābe ar naftionīnskābi. Kongo sarkanā molekula mēra 21 Ārmstrongu, un molekulmasa ir aptuveni 8000 g / mol.

Kongo sarkano raksturo šķīst ūdenī un vēl jo vairāk organiskos šķīdinātājos, piemēram, etanolā, veidojot koloidālu šķīdumu.

Tam ir afinitāte pret celulozi, amiloīdiem audiem un pozitīvi uzlādētām šūnu sastāvdaļām.

Sagatavošana

Kongo sarkanais tiek pagatavots dažādās koncentrācijās atkarībā no izmantojamās tehnikas. Lielākā daļa citu valstu izmanto Kongo sarkano - 1%, 2%, 0,1%.

Piemēram, lai pagatavotu 2% Kongo sarkano, jāizsver 2 g dehidrētas pārtikas krāsvielas un jāpievieno 100 ml destilēta ūdens. Pēc tam to glabā dzintara pudelē.

Lietojumprogrammas

Kā krāsviela tekstilrūpniecībā

Kādu laiku tas tika plaši izmantots tekstilrūpniecībā, pateicoties tā fiksācijai kokvilnā, taču pašlaik to vairs neizmanto, jo tas ir kancerogēns un arī tāpēc, ka krāsa nav stabila, mainot krāsu, berzējot.

Bioplēves veidošanās spējas noteikšana

Ir pierādīts, ka mikroorganismu bioplēves veidojošās spējas ir virulences faktors.

Šajā ziņā Kongo sarkanā krāsviela tiek izmantota kā metode bioplēves veidošanās noteikšanai. Kongo sarkanais saistās ar bioplēvē esošajiem eksopolisaharīdiem. Tomēr, salīdzinot ar citām metodēm, tas ir vismazāk ieteicams augsto nepatieso negatīvu dēļ.

Metodei izmanto Kongo sarkano agaru, kas sastāv no asiņu agara kā bāzes, glikozes (10 g / l) un Kongo sarkanās krāsvielas (0,4 g / l). Novērtējamie celmi tiek iesēti barotnē un inkubēti 24 stundas 37 ° C temperatūrā, pēc tam 48 stundas inkubēti istabas temperatūrā.

Pozitīvs tests ir redzams, ja tiek novērotas melnas krāsas un sausa izskata kristāliskās kolonijas.

Spektrofotometru kvalitātes kontrole

Lai novērtētu, vai absorbcijas vai transakciju mērīšanas iekārta atbilst fotometriskajiem parametriem, kas noteikti ar starptautiskiem noteikumiem, var izmantot vienkāršu paņēmienu, lai noteiktu, vai iekārta izdala rezultātus pieļaujamības diapazonā.

Viens no novērtēšanas paņēmieniem ir Kongo sarkanā izmantošana, pamatojoties uz izosbētisko punktu.

Izosbētiskais punkts ir viļņa garums, pie kura Kongo sarkanais izstaro tādu pašu absorbciju neatkarīgi no pH, koncentrācijas un temperatūras. Absorbcijas vērtība ir fiksēta, un to var izmantot kā atskaites punktu.

Ir zināms, ka Kongo sarkanā teorētiskais izosbētiskais punkts ir 541 nm. Ja iegūtā vērtība ir atšķirīga, ir zināms, ka iekārtai ir problēmas ar viļņa garumu, un tas jāpārbauda specializētam tehniķim.

Barotnes sagatavošana

Ortiz et al., Lai noteiktu celulīta mikrobu celmus, aprakstiet barotni, kas sagatavota ar Kongo sarkano krāsu un karboksimetilcelulozi, ko sauc par CMC agaru; tas ir, celulāzes ražotāji (endoglikonēzes, eksoglikanāzes un ß-glikozidāze).

Šim barotnei ir intensīva krāsa. Krāsu izkliedēs endoglikanāzes enzīma darbība, kas sabojā karboksimetilcelulozes struktūru. Tas liecina par pozitīvu reakciju.

Viskozitātes un absorbcijas samazināšanās ļauj noteikt fermenta aktivitāti. Piemēram, Streptomyces sp.

Mikroorganismu identificēšana

Kongo sarkanajam ir afinitāte pret noteiktu celmu polisaharīdu struktūrām, tādējādi panākot šo mikroorganismu identificēšanu. Starp tiem ir Escherichia coli un Shigella flexneri.

Kongo sarkanā agara plāksnes tiek izmantotas arī raksturīgu koloniju iegūšanai, tāpat kā Azospirillum sp gadījumā, kas cita starpā rada skarlatoniskas kolonijas.

Šūnu un audu traips

Viens no visizplatītākajiem Kongo sarkanās krāsas pielietojumiem ir tā noderība amiloidozes diagnostikā. Šī dīvainā slimība sastāv no patoloģiskas olbaltumvielas ārpusšūnu uzkrāšanās dažādos orgānos. Šis patoloģiskais proteīns tiek ražots kaulu smadzenēs un tiek saukts par amiloīdu.

Kongo sarkanajam ir augsta afinitāte pret šo vielu. Šis īpašums ir izmantots, lai parādītu tā klātbūtni histoloģisko audu sekcijās. Šim nolūkam Kongo Red tiek izmantots kopā ar hematoksilīnu / eozīnu.

Amiloido audu un Kongo sarkanā savienība notiek caur nepolārajām ūdeņraža saitēm starp karboksilgrupām un aminogrupām. Amiloīda proteīns nodrošina karboksilgrupas (COOH) un Kongo sarkano aminogrupu.

Amiloīdie audi tiek krāsoti dažādās nokrāsās, sākot no rozā līdz tumši sarkanam, kad tos redz zem gaismas mikroskopa. Mikroskopos ar divkārši polarizētu gaismu šie preparāti tiek novēroti ar patognomonisku ābolu-zaļu divkāršu noārdīšanos.

Tas ir, tie rada dihroismu, jo amiloido šķiedras ir anizotropiskas. Šis novērojums apstiprina diagnozi.

Audu krāsošana ar Kongo sarkano krāsu ir savietojama ar citām diagnostikas metodēm, piemēram, imūncitoķīmiskajām metodēm, un to var pat mainīt.

Kā pH indikators

Īpašību, kas vērsta pret pH izmaiņām, izmanto paņēmiens, ko sauc par hromoendoskopiju.

Šajā tehnikā tiek izmantotas krāsvielas un pH indikatori, kas ļauj noteikt noteiktas patoloģijas. Starp tiem ir Kongo sarkanā lietošana, kas var atklāt agrīnus vēža perēkļus kuņģa gļotādā, tiek izmantota kā skābuma marķieris.

Metode ir balstīta uz faktu, ka Kongo sarkanais pie skābes pH ir melns. Tāpēc pēc Kongo sarkanā šķīduma ievietošanas kuņģa gļotādā izvēlas tās vietas, kur ir bālums, lai ņemtu paraugu biopsijai, tas ir, tajās vietās, kur nav skābes veidošanās. Tas liecina par vēža fokusa klātbūtni vai parietālo šūnu zaudēšanu.

Atsauces

1. "Kongo sarkanais." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2019. gada 8. maijs, 12:13 UTC. 2019. gada 16. maijs, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Jaunā metode endoglikanāzes aktivitātes noteikšanai, pamatojoties uz celulozes-Kongo sarkano kompleksu. Orinoquia. 2011. gada jūnijs; 15 (1): 7-15. Pieejams vietnē: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Biofilmas ražošana Staphylococcus aureus genotipos, kas izolēti no liellopu mastīta Kubā. Rev Salud Anim. . 2013. gada decembris; 35 (3): 189.-196. Pieejams vietnē: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Ādas sistēmiskās amiloidozes izpausmes kā diagnostikas atslēga: klīniskais gadījums. Rev. medic. Čīle. 2012. gada aprīlis; 140 (4): 499-502. Pieejams: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometri un fotokolorimetri Praktiska atjaunināšanas rokasgrāmata. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (septembris-decembris): Pieejams vietnē: redalyc.org
6. Marín J, Díaz J un Solís J. Hromoendoskopija Helicobacter pylori infekcijā: vai tas ir reakcijas laiks? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organiskā ķīmija. Redakcijas reverss. Barselona, ​​Spānija. Pieejams vietnē books.google.co.ve
8. Murillo M. Audu histoloģiskās krāsošanas metodes. Gvadalaharas Universitāte, Meksika. Pieejams vietnē: Academia.edu
9. Paillié M. Aktinobaktēriju celulolītiskās, ligninolītiskās un amilolītiskās aktivitātes noteikšana, kas izolētas no baltā āboliņa (Trifolium repens) rizosfēras augsnes, 2012. gads. Pontificia Universidad Javeriana Zinātņu fakultāte Industriālās mikrobioloģijas Bogota DC Pieejams vietnē: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R un Baldani V. Azospirillum sp. Izolēšana un identifikācija uz Gvinejas zāles (Panicum maximum Jacq.) no Cēzara ielejas. Ganības un barības, 2010; 33 (3): 1-8 Pieejams: scielo.