ASINS UZTRIEPE: RAKSTUROJUMS, VEIDI, PAŅĒMIENI UN HISTOLOĢIJA - BIOLOĢIJA

Asiņu uztriepe ir perifēro asiņu uztriepe, kas tiek izmantots, lai analizētu elementiem klātesošs asinsritē. Asins uztriepes novērošana sniedz hematoloģiskus datus, kas ir ļoti noderīgi daudzu patoloģiju diagnostikā un uzraudzībā.

Asins uztriepe ļauj noteikt dažādu veidu balto asins šūnu skaitu (leikocītu formula), kā arī analizēt eritrocītu, leikocītu un trombocītu morfoloģiju un formu.

Asins uztriepes sagatavošana. Avots: asinis laboratorijas glāzē. Public DomainPictures.net

Tajā var atklāt anomālijas šūnu skaitā, piemēram: leikocitoze vai leikopēnijas, limfocitoze vai limfopēnija, neitrofilija vai neitropēnija, trombocitoze vai trombocitopēnija un eozinofilija. Var novērot arī šūnu lieluma un formas anomālijas.

Turklāt ir iespējams noteikt dažāda veida anēmijas, leikēmijas un baktēriju vai asins parazītu infekcijas.

Šim nolūkam ir dažādi uztriepes veidi, kas tiek veikti atkarībā no pētījuma mērķa. Ir plānas un biezas uztriepes. Šīs uztriepes atšķiras izpildes tehnikā un pētījuma mērķī.

Tie, kuriem ir smalki pilieni, tiek izmantoti kā papildinājums pilnīgai hematoloģijai. Tas sniedz datus par leikocītu formulu papildus trīs šūnu sērijas, kas veido asinis, formas un morfoloģijas analīzei: sarkanās sērijas, baltas sērijas un trombocīti. Lai gan tie kalpo arī kā papildinājums biezu asins plēvju izpētei.

Biezo plēvi izmanto tādu slimību diagnosticēšanai, kuras izraisa hemoparazīti, piemēram, malārija vai malārija, toksoplazmoze, leišmanioze, Čagasa slimība, babesioze un mikrofilarize.

Asins uztriepes raksturojums

Laba asiņu uztriepei jāatbilst noteiktām īpašībām. Starp tiem mēs varam minēt:

- Paraugam jāatbilst obligātajām kvalitātes prasībām, lai tas būtu reprezentatīvs.

-Atlasei jābūt labi izpildītai.

-Savlaicīga uztriepes izpilde.

-Ja to veic ar venozām asinīm, pirms uztriepes pagatavošanas izmantojiet antikoagulantu, kas nedeformē šūnas, un samaisiet mēģeni.

-Ja tas tiek darīts ar kapilāru asinīm, izmetiet pirmo pilienu.

- Izkliedei jābūt viendabīgai. Tas nodrošina, ka šūnas ir vienmērīgi sadalītas un ka var veikt labu asins šūnu formas un skaita analīzi.

- Uztriepes malām jābūt gludām no sākuma līdz beigām.

- Uztriepei ir jārespektē no 1 līdz 2 mm malu uz priekšmetstikliņa sāniem.

- Izkliedētā slāņa biezumam pakāpeniski jāsamazinās no sākuma līdz beigām (smalko pilienu nosmērēšana ar slīdēšanas metodi).

-Tas ir pareizi jāmarķē, lai izvairītos no paraugu sajaukšanas.

-Piestipriniet un notraipiet, lai skaidri novērotu asins elementus.

- Pirms preparāta ievietošanas zem mikroskopa ļaujiet uztriepei ļoti labi nožūt. Iegremdēšanas eļļas ievietošana mitrā uztriepē izraisīs micellu veidošanos, kas neļauj šūnas redzēt.

Asins uztriepes veidi

Perifēro asiņu uztriepi var klasificēt plānā un biezajā. Tos, kuriem ir plāns slānis, izmanto leikocītu formulas izpētei un asins šūnu morfoloģiskai novērošanai. Var redzēt arī ārpusšūnu baktērijas, piemēram, boreliju, un intracelulārus hemoparazītus, piemēram, plazmodiju.

Smalkajā lāpstiņā var identificēt parazīta sugas, tāpēc tas ir specifiskāks paņēmiens nekā biezs lāse, bet resnais lāse ir jutīgāks, jo tas ir koncentrēšanas paņēmiens, ko izmanto izsmeļošai ārpusšūnu hemoparazītu meklēšanai.

Ir divu veidu smalko pilienu uztriepes: tās, kas tiek veiktas ar mikroskopa priekšmetstikliņiem, un tās, kas tiek veiktas uz pārsegiem. Biezās uztriepes tiek veiktas slaidiem.

Asins paraugu ņemšanas paņēmieni

Asins uztriepi var izgatavot no kapilārā punkcijas vai venozā parauga, kas ņemts ar antikoagulantu. Ja to veic no asinīm ar antikoagulantu, uztriepi var pagatavot līdz 2 stundām pēc parauga ņemšanas.

Jāuzmanās, lietojot antikoagulantus, kas nedeformē asins šūnas. Labākais risinājums ir EDTA. Tieši pretēji, jāizvairās no antikoagulantu, piemēram, trinātrija citrāta, lietošanas.

Ja paraugu ņem ar kapilāru punkciju, uztriepi nekavējoties jāpagarina pirms asins recekļu veidošanās.

Pirmais piliens ir jāizmet, ļaujot nākamajam pilienam spontāni izkļūt, lai izvairītos no parauga atšķaidīšanas ar audu šķidrumu. Tā ir visvairāk ieteicamā metode šūnu morfoloģijas novērošanai, jo asinīs nav piedevu.

Hemoparazītu novērošanai Solari et al., Veicot pētījumus, secināja, ka abas metodes (venipunktūra un kapilāri) ir vienlīdz efektīvas.

Asins paraugu ņemšanas veidi: A. Kapilāra punkcija. B. Venozā punkcija. Avots: A. Flickr.com B. Pxhere.com

Asins uztriepes sagatavošanas paņēmieni

Asins uztriepi var manuāli veikt mikroskopa priekšmetstikliņos vai uz pārsega slīdņa vai slaida. Tas ir iespējams arī ar automatizētas iekārtas palīdzību.

-Slīd uztriepes

Tas ir paņēmiens, kuru vairākums laboratoriju dod priekšroku, pateicoties tā ērtai lietošanai.

Izmantojot Pasteur pipeti, tīrā priekšmetstikla viena gala centrā ielieciet ne pārāk biezu vai ļoti smalku asiņu pilienu.

Uztriepi izgatavo, izmantojot citu priekšmetstikliņu ar zemes galu. Slīpētā stikla priekšmetstikliņš ir novietots perpendikulāri tā pretējam galam, kur atrodas piliens.

Tas noliecas leņķī starp 30 - 45 ° un slīd pret kritienu; Pieskaroties, tas lineāri izplešas virs zemes slaida malas un ar nemainīgu un noteiktu kustību lapa atgriežas; pirms gala sasniegšanas slaidu paceļ.

Tādā veidā homogēns slānis tiek sadalīts pa uztveres slaida virsmu.

Uztriepei ļauj nožūt. Pēc tam to nostiprina un iekrāso ar vēlamo traipu. Pirms aplūkošanas mikroskopā ļauj tam labi nožūt. Uz sejas tiek uzlikts eļļas piliens, parādot uztriepi, un to novēro ar gaismas mikroskopu.

Asins uztriepe uz priekšmetstikliņa. Augšējais attēls: neuzkrāsota uztriepe. Apakšējais attēls: iekrāsota uztriepe. Avots: Coinmac

Uz priekšmetstikliņiem izgatavotās uztriepes daļas

Šāda veida uztriepē var izdalīt trīs noteiktas zonas: galvu, ķermeni un asti. Galva atbilst zonai, kurā sākas uztriepe, tā ir biezākā zona, un to nav labi novērot.

Ķermenis ir uztriepes centrālā vai starpposma daļa, tas ir labākais apgabals, ko novērot mikroskopā, jo šūnas ir vienmērīgi sadalītas un tiek saglabāta to morfoloģija.

Aste atbilst uztriepes pēdējai daļai; šeit sadalījums vairs nav vienmērīgs, un eritrocītu morfoloģijai ir tendence zaudēties.

Kvalitātes kontrole slaidu tehnikā

Šajā tehnikā tam ir būtiska loma:

- Priekšmetstikla tīrīšana un attaukošana: tas garantē labu parauga slīdēšanu.

-Piliena lielums: ar ļoti lieliem pilieniem tiks iegūta biezāka un garāka uztriepe, ar ļoti nelielu pilienu izplatīšanās būs īsāka un ārkārtīgi smalka.

-Pagarumā izmantotais ātrums: jo mazāks ir ātrums, ko uztriepe būs plānāka, jo lielāks ātrums būs biezāks.

-Izpildes leņķis: jo mazāks leņķis, jo smalkāka ir uztriepe, jo lielāks leņķis ir biezāks.

- Pakāpieties uz vāka

To plaši neizmanto, jo trauslo apvalku apstrāde ir apgrūtinoša, tomēr tā piedāvā lielas priekšrocības, jo visā uztriepes tiek panākts labāks šūnu sadalījums.

Pārklājuma centrā ir ievietots ne pārāk biezs, ne ļoti smalks piliens. Tūlīt virs tā tiek uzlikts vēl viens pārsegs tādā veidā, lai abu pārsegumu gali būtu izvirzīti, veidojot zvaigzni.

Piliens spontāni izplatīsies pa abu pārsegumu virsmām. Pagarinājuma beigās katrs slaids tiek ātri slīdēts uz pretējo pusi (viens pa labi un otrs pa kreisi).

Metode nodrošina divas uztriepes, nevis vienu.

Tos novieto nožūt ar izkliedēto pusi uz augšu. Kad sauss, tas tiek fiksēts un iekrāsots ar izvēlēto paņēmienu. Ļaujiet tai nožūt. Uz mikroskopa priekšmetstikla ievieto pilienu iegremdēšanas eļļas, uztriepi novieto ar uztriepes pusi uz leju un aplūko mikroskopā.

Kvalitātes kontrole vāka tehnikā

Lai iegūtu labu uztriepi šai tehnikai, ir svarīgi:

-Pārklājumu tīrīšana (palīdz paraugam vienmērīgi slīdēt).

- Piliena lielums (ietekmē uztriepes biezumu).

-Ātrums, ar kādu tiek atdalīti pārsegumi (ietekmē izplatības viendabīgumu).

-Ar automatizētu aprīkojumu

Tos var izdarīt, izmantojot jebkuru no šīm komandām: Spinner un Autoslide.

Spinner sastāv no priekšmetstikliņa ar asiņu pilienu novietošanas uz speciālas centrifūgas plāksnes. Paraugu centrifugē ar lielu ātrumu; šādā veidā veidojas viendabīga un smalka parauga uztriepe. Tā trūkums ir parauga hemolīzes iespēja.

Autoslide ir instruments, kas mehāniski veic kustības, lai izpildītu uztriepes uz slaidiem. Jūs varat arī salabot un notraipīt uztriepi. To var pat pielāgot dažiem automātiskiem hematoloģijas skaitītājiem.

Bieza uztriepes tehnika

Lai meklētu hemoparazītus, ieteicams izmantot divus uztriepes: vienu ar smalku pilienu un otru ar biezu pilienu.

Veiciet kapilārā punkciju, notīriet pirmo pilienu. Ievietojiet smalku pilienu uz priekšmetstikliņa un nosmērējiet, kā iepriekš paskaidrots. Biezās lodītes novietojiet lielu lodītes uz cita slaida un izklājiet 1,55 mm kvadrātā. Ļaujiet abām uztriepes nožūt.

Uztriepes iekrāsošana

Smalkiem pilieniem, cita starpā, var izmantot Giemsa vai Wright traipus. Bieziem uztriepes ieteicams lietot Giemsa vai May-Žalgiris Giemsa traipus.

Giemsa traipu

Uztriepi 3 minūtes fiksē ar metanolu, iztukšo un ļauj tai vēlreiz nožūt. Pēc tam uztriepi 10-15 minūtes pārklāj ar Giemsa traipu. To mazgā ar destilētu ūdeni un ļauj nožūt. Lai novērotu zem mikroskopa, ieliek iegremdēšanas eļļas pilienu.

Wright traipu

Uztriepi 5 minūtes pārklāj ar Wright traipu. Izmetiet un 6 minūtes novietojiet buferšķīdumu ar pH 6,8. Pūš preparātu līdz homogenizēšanai. Nomazgājiet ar destilētu ūdeni un ļaujiet nožūt. Novērot zem mikroskopa.

Bojātu uztriepes veidi

Tas rodas praktikantiem smalko pilienu tehnikā ar slaidiem.

Smērē ar dažāda biezuma laukumiem (plāni un biezi sakrustoti)

Tas ir tāpēc, ka izpildītā kustība nebija vienmērīga izplatīšanās laikā, apstājoties un atsākoties.

Ļoti īss uztriepes uztriepes

Viņiem ir 2 cēloņi: viens ir saistīts ar faktu, ka zemes slīdnis ir pacelts pirms slaida otra gala sasniegšanas. Šajā gadījumā tas ir ārkārtīgi biezs un īss.

No otras puses, ja uztriepe ir īsa, bet plāna, tas ir tāpēc, ka piliens bija ļoti mazs.

Nosmērējiet ar raked zonu uztriepes gala virzienā

Tam ir vairāki cēloņi: viens ir tāds, ka zemes mala ir nepilnīga, ka spiedienam, kas tiek veikts uz uztveres slaidu, ir palielināts izkliedēšanas laikā vai ka slaida zemes mala ir nodilusi.

Iesmērē ar vakuolu veidošanos vai skaidriem noapaļotiem vai eliptiskiem laukumiem

To iemesls ir taukainu uztriepi (slikti mazgāti un attaukoti).

Ļoti biezi vai ļoti plāni uztriepes

Pārāk lieli pilieni radīs ļoti biezas uztriepes no sākuma līdz beigām, un ļoti mazi pilieni veidos ļoti smalkas uztriepes.

Histoloģija

Asins šūnās var redzēt asins uztriepi. Starp tiem ir:

- Eritrocīti vai sarkanās asins šūnas

Cilvēka asinis, eritrocīti vai sarkanās asins šūnas un divas baltas asins šūnas. Uzņemts un rediģēts no: Viascos, jūsu novērojums ir ārkārtīgi svarīgs. Šajā līmenī var noteikt anēmijas, talasēmiju, kaulu smadzeņu slimības utt.

Eritrocītu vai sarkano asins šūnu skaits ir aptuveni 5 x 10 ⁶ mm3 vīriešiem un 4,5 x 10 ⁶ sievietēm. Sarkanās asins šūnas ir veidotas kā abpusēji ieliekti diski ar centrālu fizioloģisku bālumu. Tos var redzēt atsevišķi (normāli) vai veidojot rouleaux skursteņus (neparasti).

Uztriepes parāda arī poikilocitozi (dažādu formu sarkanās asins šūnas), anizocitozi (dažāda lieluma sarkanās asins šūnas), anizopoikilocitozi (dažādas formas un izmēra), anisohromiju (dažādas krāsas), eritroblastus (nenobriedušas sarkanās asins šūnas), mikrocitozi (mazākas sarkanās asins šūnas). ) un makrocīti (lielāki eritrocīti).

Kad viņiem ir hemoglobīna daudzuma deficīts un palielinās centrālā bālums, tiek teikts, ka ir hipohromija. Kad tiek novērota normāla sarkana sērija, tā tiks norādīta kā normocītiska un normohroma.

-Baltas asins šūnas vai leikocīti

baltās asins šūnas

Parastais daudzums svārstās no 5000 līdz 10 000 mm ³ . Tie ir mainīti infekcijas procesos, alerģijās un leikēmijā. Asins uztriepē var atšķirt vairākus veidus, kas ir izskaidroti zemāk.

Segmentēti neitrofīli

Tie veido 55-65% no kopējā leikocītu skaita. To izmērs ir no 10-15 μm. Viņiem ir segmentēts vai lobēts kodols, kas pieņem dažādas morfoloģijas, tāpēc to sauc par polimorfonukleāro.

Viņu citoplazmā ir bagātīgas neitrofilo granulu un daži azurofīli. Tās palielinās baktēriju infekciju (neitrofilijas), vīrusu infekciju samazināšanās (neitropēnijas) gadījumā.

Var novērot tādas morfoloģiskas novirzes kā pleokariocitoze (hiper segmentēti kodoli), arkas (nenobriedušas šūnas) vai makropolitiki (ovālas formas un lieli).

Citas izmaiņas:

-Toksiskas granulācijas

-Pseido Pelgera neitrofīli (kodolā nav lobulāciju vai tie ir izplūduši).

-Döhle ķermeņi: tumši zili citoplazmas ieslēgumi.

-Paaugstināta citoplazmatiskā bazofilija.

-Intracytoplasmic vakuoli.

-Cellular picnosis (kodolu tiltu zudums).

Segmentēti eozinofīli

Tie veido 1–3% no balto asins šūnu kopskaita. Viņi mēra 9-10 μm. Viņiem ir raksturīgas bagātīgas acidofilās citoplazmatiskās granulas un maz azurofilu. Tās kodolā ir divas lobulācijas. To skaits palielinās alerģiju un parazitāras izcelsmes slimību gadījumā.

Segmentēti basofīli

Tie ir ārkārtīgi reti, veido 0–1% leikocītu. Viņi mēra 10-12μm. Kodols parasti ir neregulārs ar malām un var būt nokrāsots, bet tas netiek novērots, jo tā citoplazmā ir liels skaits bazofilu rupju granulu. Ļoti reti var novērot bazofiliju.

Limfocīti

Tās ir mazas šūnas ar bazofīlu citoplazmu, ar kodolu, labi definētu, apaļu, ar kondensētu hromatīnu. Kodols aptver gandrīz visu šūnu. Tie pārstāv 26–40% asins leikocītu. Tās palielinās vīrusu infekciju gadījumā (limfocitoze). Var redzēt reaktīvos limfocītus.

Monocīti

Šūnas, kas lielākas par limfocītiem, ar lielāku citoplazmu un brīvāki, ovāli hromatīna kodoliem. Viņi mēra 9-12μm. Citoplazma ir bagātīga un parasti parādās gaiši pelēcīgi zilā krāsā ar standarta krāsošanas paņēmieniem. Starp izmaiņām var novērot vakuolētus monocītus un monocitozi.

-Platītes

Tās mēra no 1,5-3 μm. Tās forma ir apaļa vai ovāla. Normālā vērtība svārstās no 150 000 līdz 350 000 trombocītu / mm3. Dažās vīrusu infekcijās tie var samazināties. Viņiem nav kodola un tie ir purpursarkanā krāsā. Šajā sērijā var novērot novirzes, piemēram, makro vai mikro trombocītus, trombocitozi vai trombocitopēniju un trombocītu fragmentus.

Patoloģiskie elementi

Asins parazīti

Asins uztriepēs var redzēt hemoparazītus, piemēram, malārijas vai malārijas izraisītāju (Plasmodium ģints parazīti). Šī iemesla dēļ ir svarīgi, lai uztriepi analizētu manuāli, jo automatizētais aprīkojums nokavē šo atradumu.

Baktērijas

Patoloģijās, piemēram, recidivējošā drudža vai Laima slimības gadījumā, var novērot tās izraisītāju. Šajā gadījumā tas atbilst Borrelia recurrenti spirochetes un Borrelia burgdorferi asinīm.

Nenobriedušas šūnas

Smagi gadījumi, cita starpā, tiek novēroti leikēmijās, leukemoīdās reakcijās un leikoeritroblastiskajā reakcijā. Bakteriālas infekcijas gadījumā var būt nelielas novirzes pa kreisi (kroku klātbūtne). Eritroblasti var būt redzami arī dažās anēmijās.

Atsauces

Asinis un asinsrades audi. Pieejams vietnē: sld.cu
Gomez A, Casas M. 2014. Eņģelis. Klīniskās laboratorijas interpretācija. 8. izdevums. Redakcija Médica Panamericana.
Solāriji Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos konti A. Parazītu blīvuma salīdzinājums biezu venozo asiņu pilienā pret akupresūru Malārijas vivax diagnozē. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140–143. Pieejams vietnē: scielo.org.
Terijs Leonards Nelsons, Mendoza Hernández Carlos. Perifēro asiņu uztriepes pētījuma nozīme gados vecākiem cilvēkiem. Medisur 2017; 15 (3): 362–382. Pieejams vietnē: scielo.sld
Grinspans S. Perifēro asiņu uztriepes pētījums. Tālāka medicīniskā izglītība. Pieejams vietnē: bvs.hn/RMH

ASINS UZTRIEPE: RAKSTUROJUMS, VEIDI, PAŅĒMIENI UN HISTOLOĢIJA - BIOLOĢIJA - 2025