ASINS KULTŪRA: KAM TĀ PAREDZĒTA, PAMATOJUMS, PROCEDŪRA, REZULTĀTI - BIOLOĢIJA - 2025

Asinis kultūra ir bakterioloģiskais tests, kuras mērķis ir atklāt klātbūtni mikroorganismu asinīs. Asinis pēc savas būtības ir sterils šķidrums, tāpēc tās jāuztur fizioloģiskos apstākļos, tāpēc baktēriju vai sēnīšu klātbūtne asinīs vienmēr ir patoloģiska.

Kad baktērijas vai sēnītes ir asinīs, bet vairošanās nepārsniedz mikroorganismu izvadīšanu ar imūnsistēmas palīdzību, to sauc par bakteriēmiju (baktērijām) vai fungemia (sēnītēm); Bet, ja mikroorganismu skaits nekontrolējami palielinās, to sauc par septicēmiju.

Asins kultūras pudeles (dzeltenā krāsā: bērnu aerobioze, zaļā krāsā: pieaugušo aerobioze un sarkanā krāsā: pieaugušo anaerobioze). Avots: fotogrāfijas autore ieguvusi MSc Marielsa Gil.

Bakterēmija, fungemija un septicēmija apdraud pacienta dzīvību, tāpēc tās nekavējoties jāārstē. Tieši tāpēc, kad ir aizdomas par inficēšanos asinīs, ārsti pieprasa veikt asins kultūras pētījumu.

Šī bakterioloģiskā analīze ļauj uzzināt, vai asinīs ir infekcija vai nav, un kāds ir iesaistītais mikroorganisms. Turklāt, ja tas ir pozitīvs, tiek veikts jutīguma tests, lai zināt, kuru antibiotiku vai pretsēnīšu līdzekli varētu izmantot ārstēšanā.

No otras puses, ja asins kultūra 24 stundu inkubācijas stundā ir negatīva, to nevajadzētu izmest, kamēr tas nav negatīvs 240 stundas. Tas nodrošina, ka nav lēni augošu mikroorganismu.

Lai asins kultūra būtu uzticama, parauga ņemšanā jāveic ārkārtīgi aseptiski pasākumi, un, lai palielinātu testa ticamību un jutīgumu, drudža maksimuma laikā vai tā tuvumā jāņem vismaz divi paraugi.

Kam tas domāts?

Asinis ir sterils šķidrums, un, ja tajā tiek atrasti mikroorganismi, tas ir 100% patoloģisks. Šī situācija atspoguļo ļoti delikātu klīnisko ainu, kas apdraud pacienta dzīvi.

Asins kultūra ir svarīgs bakterioloģiskais tests, kas nosaka mikroorganismu klātbūtni asinsritē.

Mikroorganismi asinīs var nokļūt dažādos veidos, kas varētu būt ekstravaskulāras infekcijas, piemēram: pneimonija, intraabdominālās infekcijas, pielonefrīts, nopietnas ādas infekcijas, mīkstie audi vai artrīts.

Vai arī tas var būt intravenozi, piemēram, intravenozi vai artēriju katetru piesārņojums, endokardīts, intravenozas narkotiku atkarības, inficētu zāļu vai šķīdumu ievadīšana utt.

Sepses izraisītāja savlaicīga noteikšana un ārstēšana ir būtiska, lai nodrošinātu pacienta izdzīvošanu.

Šajā ziņā ārstam jānorāda asins kultūras ieviešana, kad viņš novēro pazīmes un simptomus, kas rada aizdomas par septicēmiju, piemēram: drudzi (virs 38 ° C) bez acīmredzamas infekcijas fokusa vai, gluži pretēji, hipotermiju (<de 36 ° C).

Citas pazīmes var būt: drebuļi, palielināts leikocītu skaits (> 10 000 šūnas / mm ³ ) vai ievērojams polimorfonukleāro šūnu samazinājums (<1000 PMN / mm ³ ). Kā arī daudzorganismu pasliktināšanās vai vitalitātes zudums pēkšņi, starp citām brīdinājuma zīmēm.

Bakterēmija var būt nemainīga, pārejoša vai periodiska. Tas ir svarīgi paraugu ņemšanai, jo tas ir jāņem, kad ir lielāka varbūtība, ka mikroorganisms cirkulēs.

Tāpēc ieteicams ņemt vismaz 2 paraugus dažādās vietās. Turklāt ideāls ir tas, ka paraugu ņem drudžainā laikā vai kad pacientam ir drebuļi, izteikta hipotermija, svīšana vai tahikardija.

Tomēr, lai asins kultūra būtu patiešām noderīgs līdzeklis, paraugs jāņem ļoti rūpīgi. Sliktas manipulācijas vai slikta asepsija parauga ņemšanas brīdī var anulēt testu, iegūstot nepatiesus pozitīvus rezultātus.

Pamats

Pētījums sastāv no divu vai trīs asins paraugu ņemšanas aseptiski un ievietošanas īpašās pudelēs.

Īpašas ierīces asins paraugu kultivēšanai sauc par asins kultūras pudelēm. Tos klasificē šādi:

Atkarībā no pacienta vecuma

-Pediatrijā

-Pieaugušajiem.

Atbilstoši mikroorganismu tipam

-Kolbas aerobiem mikroorganismiem (aerobām baktērijām, fakultatīvām baktērijām un sēnītēm).

-Asins kultūras pudeles anaerobiem mikroorganismiem (stingrām anaerobām baktērijām).

Daži satur šķidru barotni, bet citi - vienlaikus cietu un šķidru barotni. Tie pastāv arī ar aktivētās ogles daļiņām.

Process

Ieteikumi paraugu ņemšanai

- Paraugs, kas jāņem augsti apmācītam un apmācītam personālam mikrobioloģijas jomā.

- Neapšaubāmi vissvarīgākais solis ir asepsis vai rūpīga paraugu ņemšanas vietas tīrīšana.

- Tāpat kā visos paraugu ņemšanas gadījumos, veselības aprūpes personālam procesa laikā pilnībā jāievēro bioloģiskās drošības pasākumi (cita starpā, cimdu, halāta, brilles lietošana).

- Pārliecinieties, ka ir pieejami visi paraugu ņemšanai nepieciešamie piederumi.

- Marķējiet flakonus ar pacienta pilnu vārdu, datumu, medicīniskās dokumentācijas numuru, paraugu ņemšanas laiku un laboratorijas kārtas numuru.

- Ideāls ir ņemt paraugu pirms pacients sāk antibakteriālo terapiju. Tikai gadījumā, ja ir aizdomas par notiekošo ārstēšanu, tas ir norādīts. Šajā gadījumā paraugs jāņem pirms zāļu maiņas, izmantojot asins kultūras pudeles ar antibiotiku inhibitoriem (aktivētās ogles daļiņas).

- Jāņem vismaz 2 paraugi dažādās anatomiskās vietās, piemēram, labajā un kreisajā pusē. Ja ir aizdomas par endokardītu, ieteicams veikt 3 paraugus. Katrā paraugā tiks iekļautas divas pudeles (viena aerobiozei un otra anaerobiozei).

Parauga daudzums

Parauga daudzums mainās atkarībā no pacienta vecuma, taču vienmēr jāsaglabā attiecība 1: 5 līdz 1:10 attiecībā uz asiņu / kultūras buljona atšķaidīšanu.

Jaundzimušajiem ieteicamais parauga daudzums ir 1 ml asiņu vienā flakonā. Tiek izmantota bērnu pudele.

Zīdaiņiem no viena mēneša līdz vienam gadam to var palielināt līdz 1,5 ml asiņu pudelē. Tiek izmantota bērnu pudele.

Bērniem vecākiem par 2 gadiem flakonā piemērots parauga daudzums ir 2,5 ml asiņu. Tiek izmantota bērnu pudele.

Kopš pusaudža vecuma to var palielināt līdz tilpumam asinīs no 5 līdz 10 ml pudelē. Tiek izmantota pudele pieaugušajiem.

Visbeidzot, pieaugušo stadijā nepieciešamais daudzums ir 8-10 ml pudelē. Tiek izmantota pudele pieaugušajiem.

Paraugu ņemšana

- Asins paraugs var būt venozs vai arteriāls. Tomēr arteriālās asinis ņem tikai tad, ja venozo paraugu ņemšana nav iespējama.

- Nav ieteicams ņemt paraugu no centrālā vēnu katetra, ja vien:

1. Nevar ņemt paraugu perifēri (venozu vai arteriālu).
2. Pacienti, kuriem ir asiņošanas risks.
3. Kad ārstam ir aizdomas par bakterēmiju centrālās vēnu katetra piesārņojuma dēļ.
4. Kad drudzis atkārtojas pēc febrilas pārtraukšanas 4–5 dienas, neatkarīgi no tā, vai pacients ārstējas ar antibakteriāliem līdzekļiem.

Asepsis pirms paraugu ņemšanas

- Izvēlieties anatomiskās vietas paraugu ņemšanai. Parasti tiek izvēlētas vislabākā kalibra vēnas (bazilikālās vai cefālās vēnas).

- Saskaņā ar Slimību kontroles centriem (CDC) Atlantā (ASV) operatoram pirms cimdu noņemšanas jāmazgā rokas ar 2% hlorheksidīna vai 10% povidona joda.

-Paloģējiet un atrodiet lietojamo vēnu.

- Notīriet punkcijas laukumu rotējošā veidā, veicot kustības no centra uz āru, izmantojot ziepjūdeni ar hlorheksidīnu vai antiseptiskām ziepēm. Noskalo ar sterilu fizioloģisko šķīdumu.

Pēc tam uzklājiet antiseptisku līdzekli un ļaujiet tam rīkoties. Piemērs hlorheksidīna glikonāts 0,5% 1 minūti vai povidona jods 10% 2 minūtes. Attiecībā uz pēdējo vispirms pajautājiet, vai pacientam nav alerģijas pret jodu. Ja jums ir alerģija, jūs varat aizstāt 70% alkohola.

Paraugu iegūšana

- Novietojiet žņaugu, lai saasinātu asins plūsmu un dīgtu vēnu.

- Vēlreiz nepieskarieties punkcijas vietai ar pirkstu. Ja tas ir absolūti nepieciešams, pirksts jāmazgā tāpat kā punkcijas zona.

- Ievietojiet injekcijas adatu vai galvas ādu vēnā un izvelciet nepieciešamo asiņu daudzumu.

-Nevietojiet adatu, ja tā nav sterila, nelieciet kokvilnu vai marli.

- Ļoti uzmanīgi un nepieskaroties vāciņam, noņemiet no pudelēm drošības zīmogu. Daži autori iesaka pirms parauga inokulēšanas veikt vāciņa dezinfekciju.

- Flakonos izdaliet atbilstošu asiņu daudzumu. Ja paraugu ņem ar inžektoru, vajadzīgo daudzumu vispirms ielej anaerobā kolbā un pēc tam aerobā kolbā. Ja ņemšana notiek ar galvas ādu (tauriņš), to ielej pretējā veidā.

- Asins kultūras pudeli viegli samaisa, apvēršot to.

- Nomainiet cimdus un atkārtojiet iepriekšējās darbības otrajai paraugu kolekcijai.

-Ja otrais paraugs tiek ņemts no citas vietas, to var izdarīt nekavējoties, bet, ja tas ir no vienas un tās pašas vietas, jums jāgaida 30 līdz 90 minūtes starp vienu un otru paraugu.

- Paraugs pēc iespējas ātrāk jānogādā laboratorijā, ja tas nav iespējams, tas jāatstāj istabas temperatūrā līdz 18 stundām.

Kultūra

Pēc laboratorijas ievietošanas kolbas tiek inkubētas 37 ° C temperatūrā katras kolbas apstākļos, tas ir, attiecīgi aerobiozes un anaerobiozes apstākļos.

Izmantojot manuālo metodi, zvana sākšana jāveic 24 inkubācijas stundās un pēc tam zvana katru dienu. Gredzenus veic šādi: vispirms tiek dezinficēts pudeles vāciņš un ievietota sterila injektora adata. Šķidrumu ekstrahē no kolbas un sēj uz asins agara un šokolādes agara.

Ja ir augšana, tiek veikts grams, subkultūras īpašos barotnēs, bioķīmiskie testi un antiiogramma.

Automatizētās metodēs Bact / Alert aprīkojums izdala trauksmi, kad atklāj, ka flakons ir pozitīvs. Tādā pašā veidā to vajadzētu iespiest asins agaram un šokolādes agaram.

Vēl viena metode, kas arvien pieaug, ir analizēt kolbu pēc 6 stundu inkubācijas, izmantojot masas spektrometriju. Šī metode ir palīdzējusi palielināt diagnozes jutīgumu un ātrumu.

Rezultāti

Kamēr asins kultūras pudele ir negatīva, provizoriskos starpposma ziņojumus var sniegt ārstējošajam ārstam. Ziņojumā norādīts, ka tā inkubācijas stundās ir negatīva. Piemēram, ja tas kļūst negatīvs līdz ceturtajai dienai, tas tiek ziņots šādi:

Provizoriskais rezultāts: negatīva kultūra 96 ​​inkubācijas stundās.

Piezīme: pētījums turpinās 240 stundas.

Ja asins kultūra ir pozitīva, nekavējoties tiek informēts ārstējošais ārsts un nosūtīts ziņojums ar vismaz kolonijas gramiem. Piemērs:

Provizorisks rezultāts: pozitīvā kultūrā 48 inkubācijas stundās tiek novērotas gramnegatīvas baktērijas un negatīva oksidāze. Notiek identifikācija un jutības pārbaude.

Šī informācija palīdz ārstējošajam ārstam sākt empīrisko terapiju iespējamo mikroorganismu jomā, gaidot laboratorijas gala rezultātu.

Pabeidzot bakterioloģisko pētījumu, tas ir, ir identificēts mikroorganisms un ir pieejama pretiogramma, galīgais ziņojums jānosūta pēc iespējas ātrāk.

Īpaša piesardzība jāveic, ja mērķa mikroorganisms ir Neisseria gonorrhoeae vai Neisseria meningitidis, jo šīs baktērijas tiek kavētas, ja ir augsta nātrija polianetosulfonāta (SPS) koncentrācija.

Tāpēc asins kultūras pudelēs šis savienojums nedrīkst pārsniegt 0,025%.

No otras puses, ja asins kultūras paraugu vispirms ņem Vacutainer mēģenēs, šajās mēģenēs ir SPS koncentrācija, kas ir toksiska meningokokiem un gonokokiem, tāpēc asinis 1 stundas laikā jāpārnes buljonu kultūras sistēmā.

Kā noteikt, vai asins kultūra ir pozitīva vai piesārņota?

Asins kultūru uzskata par inficētu, ja no kopējā ņemtā asins daudzuma ir tikai viens flakons. Un aizdomas par inficēšanos palielinās, ja izolētais mikroorganisms ir parastā ādas mikrobiota: piemērs: Staphylococcus koagulāzes negatīvs, Propionibacterium spp.

Tomēr pacientiem ar novājinātu imunitāti nevajadzētu atstāt novārtā nevienu mikroorganismu, bet šajā gadījumā mikroorganisms jāparādās vairākos paraugos.

No otras puses, ja jutība pret tā paša mikroorganisma antibiotikām, kas izolēti divos dažādos paraugos, ir vienāda, infekcija ir reāla.

Vēl viena pazīme ir baktēriju daudzums, jo inficētās asins kultūras aug novēloti, bet reālas infekcijas neārstētiem pacientiem parasti ir pozitīvas 14 inkubācijas stundās, kad mikroorganisms nav apgrūtinošs.

No otras puses, pacientiem, kuri tiek ārstēti ar antibakteriāliem līdzekļiem, iesaistītajam mikroorganismam var būt nepieciešams laiks, lai izaugtu, jo slodze ir ļoti maza.

Vairāku mikroorganismu parādīšanās var liecināt par piesārņojumu, bet, ja tas pats rezultāts tiek atkārtots vairākos kadros no dažādām vietām, tad tas ir reāls.

Atsauces

1. "Asins kultūra." Wikipedia, bezmaksas enciklopēdija. 2019. gada 3. jūlijs, 17:28 UTC. 2019. gada 14. jūlijs, 19:05 lv.wikipedia.org
2. Hervé B. Jaunas tehnoloģijas mikrobioloģiskajā diagnostikā: automatizācija un daži lietojumi mikrobu identificēšanā un jutības pētījumos. Medicīnas klīnika Skaitās. 2015; 26 (6) 753-763. Pieejams vietnē: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. 20. nodaļa: Sepse un sirds un asinsvadu slimību risks. Sirds un asinsvadu veselība. 187.-194. Pieejams vietnē: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras EM Asins kultūras: Ko viņi jums ir teikuši un ko jūs darāt? Slims glob. 2012; 11 (26): 146-163. Pieejams vietnē: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Pozitīvas asins kultūras iegūšanas varbūtība. Med. Interna Mex. 2017. gads; 33 (1): 28–40. Pieejams vietnē: scielo.org